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產(chǎn)品概述

Cell Meter 比色法MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒是一套用于檢測(cè)細(xì)胞活力的工具。 Cell Meter 比色法MTT細(xì)胞增殖檢測(cè)試劑盒使用MTT（3-（4,5-二甲基噻唑-2-基）-2,5-二苯基四氮唑溴化物）定量活細(xì)胞的數(shù)量。水溶性MTT在代謝活性細(xì)胞中產(chǎn)生水不溶性紫色甲瓚。產(chǎn)生的甲瓚的數(shù)量與活細(xì)胞的數(shù)量成正比。在560 nm附近測(cè)得吸光度增加。與其他需要繁瑣的增溶步驟來溶解不溶于水的甲瓚產(chǎn)物的其他商業(yè)MTT測(cè)定法不同，Cell Meter 比色MTT細(xì)胞增殖試劑盒只需很少的人工操作。我們專有的配方去除了費(fèi)時(shí)的增溶步驟。它是確定細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性測(cè)定中活細(xì)胞數(shù)量的強(qiáng)大的MTT試驗(yàn)。檢測(cè)靈敏度比傳統(tǒng)的MTT分析高10倍。

實(shí)驗(yàn)方案

樣品分析方案

概述

在96孔板中制備細(xì)胞（100 µL /孔）
添加MTT工作溶液（140 µL /孔）
在37°C下孵育2-4小時(shí)
讀取560 nm處的吸光度

注：使用前，請(qǐng)?jiān)谑覝叵陆鈨鏊性噭┖薪M分。

工作溶液制備：

通過將4 mL MTT試劑A（組分A）與10 mL MTT試劑B（組分B）（2：5，MTT試劑A：B的體積比）混合，制備所需的MTT工作溶液量，混勻。

注意：14 mL MTT工作溶液足以在96孔板上進(jìn)行100次測(cè)試。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備足夠的MTT工作溶液，并及時(shí)使用。

操作步驟

1.在具有透明底的組織培養(yǎng)孔板中，培養(yǎng)1000至40,000個(gè)細(xì)胞/孔。
2.將測(cè)試化合物添加到細(xì)胞中，并在37°C，5％CO2培養(yǎng)箱中孵育所需的時(shí)間（例如24、48或96小時(shí)）。3.對(duì)于空白孔（不含細(xì)胞的培養(yǎng)基），添加相同量的測(cè)試化合物。對(duì)于96孔板，建議的總體積為100 µL，對(duì)于384孔板，建議的總體積為25 µL。
注意：應(yīng)對(duì)每個(gè)細(xì)胞系進(jìn)行單獨(dú)評(píng)估，以確定增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞毒性的細(xì)胞密度。對(duì)于增殖測(cè)定，使用較少的細(xì)胞；對(duì)于細(xì)胞毒性測(cè)定，請(qǐng)使用更多的細(xì)胞作為開始。
4.向每個(gè)孔中加入140 µL /孔（96孔板）或35 µL /孔（384孔板）。
5.在37°C下孵育平板2-4小時(shí)，避光。
注意：根據(jù)不同的細(xì)胞類型和使用的細(xì)胞濃度，孵育時(shí)間可能從2小時(shí)到過夜。優(yōu)化每個(gè)實(shí)驗(yàn)的孵育時(shí)間。
用吸光度板讀數(shù)器在OD = 562 nm處檢測(cè)吸光度。