用途范圍： 科研實驗 不得用于臨床診斷

純度： 99 %

產(chǎn)地： 上海

品牌： 科翰盛生物

規(guī)格： 25T 50T

貨號： KHS-21420

本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分。現(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性,因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M行準確的鑒定。同時部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品,它具有下列特點:

1. 一管式操作,用戶只需要提供樣品即可。

2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計引物,能專一性檢測出樣品中的大豆成分,但不能檢測其他非大豆成分。

3. 快速,整個檢測過程(按一個樣品計)所需時間僅為 2.0 小時。

4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀,無需配置貴重儀器設(shè)備。

5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%,對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。

6. 本只能用于科研,足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。

白色念珠菌PCR試劑盒包裝規(guī)格及成分:

注:試劑五(DNA 釋放劑試用裝)包含以下3種成分:試劑六(免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一);試劑七(免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二);試劑八(免 DNA 提取試劑溶液 B)

運輸及保存:低溫運輸,-20℃保存,有效期一年。使用本試劑盒提供的陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。*在專門的區(qū)域操作。

自備試劑:DNA 模板。

白色念珠菌PCR試劑盒使用方法:

一、樣品 DNA 的制備

1. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。

2. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。如果用本試劑盒自帶的DNA 釋放劑試用裝。則按下面步驟操作:

3. 配制溶液 A 工作液。以配制 1mL 工作液(足夠 10 個樣品)為例:在一干凈塑料管中加入 10uL 溶液 A 成分一,20uL 溶液 A 成分二和 970uL 超純水,充分混合均勻即可。溶液 A 工作液可室溫放置,但*在一周內(nèi)用完,不要長期放置。一次檢測一個樣品需要 100uL 溶液 A 工作液,1mL 工作液足夠 10 個樣品。如果待測樣品數(shù)量為其他數(shù)字,配制的溶液 A 工作液的體積需要做相應(yīng)的調(diào)整。

4. 在標記好的 N+2 個離心管中,加入 1-5mg 固體樣品(半粒芝麻大小)或 5uL 液體樣品待測樣品。在樣品制備陽性對照中加入 5uL 陽性對照,在樣品制備陰性對照中加入 5uL 水。

5. 在每個管中加入 100 uL 溶液 A 工作液,確保固體樣品被溶液淹埋,如果是液體樣品則震蕩混勻。

6. 95℃保溫 10 分鐘。

7. 待冷卻到常溫后加入 10uL 溶液 B 并混勻得 DNA 釋放液。每個樣品得到的 DNA釋放液足夠進行 50-100 次 PCR。

二、白色念珠菌PCR試劑盒 設(shè)置 PCR 反應(yīng)(40 uL 體系)

8. 在 N+2 個 PCR 管中加入下列成分,下面以樣品數(shù)為 1 舉例(注意:如果 次使用DNA 釋放劑,*每個樣品設(shè)置兩個模板用量的 PCR 反應(yīng),兩個反應(yīng)的模板使用量差 10 倍,由此確定*用量,以后就用效果*的那個模板用量):

9. 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 PCR。

10. 電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 216bp。陽性對照必須有此條帶出

現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實驗無效。對沒有擴增產(chǎn)物的樣品,需要用通用引物(如真核生物專一 PCR 引物,需自備)測試是否有抑制劑或樣品是否濃度達到 PCR 的要求,如果通用引物也擴不出來,需要濃縮并再次純化 DNA 樣品,或者更換 DNA 提取方法,直到通用引物能夠擴增出預計大小的片段。