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碘化丙啶(PI)染色液

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細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

產(chǎn)品概述碘化丙啶(PI)染色液為AnnexinV鑒定凋亡和壞死細(xì)胞輔助試劑

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品概述

碘化丙啶(PI)染色液為Annexin V鑒定凋亡和壞死細(xì)胞輔助試劑。
碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)可與雙鏈DNA特異性結(jié)合，并產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光，正常情況下無(wú)法透過(guò)細(xì)胞膜。由于凋亡晚期或壞死細(xì)胞膜喪失完整性，PI可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)對(duì)DNA進(jìn)行染色，與Annexin V搭配使用，可區(qū)分處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞。
本試劑搭配Annexin V-FITC檢測(cè)誘導(dǎo)的Jurkat細(xì)胞凋亡效果如下圖所示：

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實(shí)驗(yàn)操作指南步驟：
1. 細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行凋亡誘導(dǎo)，300g離心5min，棄上清，收集細(xì)胞，PBS洗滌一次，輕輕重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù)。
注：本品僅在懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞中驗(yàn)證，良好的細(xì)胞狀態(tài)是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用于凋亡檢測(cè)時(shí)，可能會(huì)因?yàn)橄?、吹打等處理?dǎo)致細(xì)胞的壞死或凋亡，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能存在不可控的影響，請(qǐng)謹(jǐn)慎處理。
2. 取1-5×10^5重懸的細(xì)胞，300g離心5min，棄上清。用PBS洗滌細(xì)胞一次，離心后棄上清，加入500μL稀釋的1×Annexin V Binding Buffer工作液重懸細(xì)胞。
3. 細(xì)胞懸液中加入5μL的Annexin V-熒光染色液和5μL的碘化丙啶(PI)染色液。
4. 輕柔渦旋混勻后，室溫避光孵育15-20min。
5. 反應(yīng)完成后立即上機(jī)檢測(cè)。如不能及時(shí)檢測(cè)，請(qǐng)于冰上避光靜置并于1小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。

保存條件：
4℃可保存1年；碘化丙啶(PI)染色液需要避光保存。

注意事項(xiàng)：
1. 為獲得的使用效果，請(qǐng)?jiān)?-6個(gè)月內(nèi)使用；
2. 染色后宜盡快檢測(cè)，時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加；
3. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，進(jìn)行熒光觀察時(shí)，盡量縮短觀察時(shí)間，操作和存放過(guò)程盡量注意避光保存；
4. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

(本試劑產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用，不可用于臨床診斷或治療)