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武漢普諾賽生命科技有限公司


7-AAD染色液

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更新時(shí)間:2023-01-16 08:32:13瀏覽次數(shù):345次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

產(chǎn)品概述7-AAD染色液為AnnexinV鑒定凋亡和壞死細(xì)胞輔助試劑

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品概述

7-AAD染色液為Annexin V鑒定凋亡和壞死細(xì)胞輔助試劑。
7-AAD可與雙鏈DNA特異性結(jié)合,并產(chǎn)生強(qiáng)烈的熒光,正常情況下無(wú)法透過(guò)細(xì)胞膜。由于凋亡晚期或壞死細(xì)胞膜喪失完整性,7-AAD可進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)對(duì)DNA進(jìn)行染色,與Annexin V搭配使用,可區(qū)分處于不同凋亡時(shí)期的細(xì)胞。
本試劑搭配Annexin V-APC檢測(cè)誘導(dǎo)的Jurkat細(xì)胞凋亡效果如下圖所示:

ZJ2050{`~C1_C[__YGV28PB.png


實(shí)驗(yàn)操作指南步驟:
1. 細(xì)胞按照實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行凋亡誘導(dǎo),300g離心5min,棄上清,收集細(xì)胞,PBS洗滌一次,輕輕重懸細(xì)胞并計(jì)數(shù)。
注:本品僅在懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞中驗(yàn)證,良好的細(xì)胞狀態(tài)是實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵。貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞用于凋亡檢測(cè)時(shí),可能會(huì)因?yàn)橄?、吹打等處理?dǎo)致細(xì)胞的壞死或凋亡,對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果可能存在不可控的影響,請(qǐng)謹(jǐn)慎處理。
2. 取1-5×10^5重懸的細(xì)胞,300g離心5min,棄上清。用PBS洗滌細(xì)胞一次,離心后棄上清,加入500μL稀釋的1×Annexin V Binding Buffer工作液重懸細(xì)胞。
3. 細(xì)胞懸液中加入5μL的Annexin V-熒光染色液和5μL的7-AAD染色液。
4. 輕柔渦旋混勻后,室溫避光孵育15-20min。

5. 反應(yīng)完成后立即上機(jī)檢測(cè)。如不能及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)于冰上避光靜置并于1小時(shí)內(nèi)完成檢測(cè)。


保存條件:
-20可保存1年;7-AAD染色液需要避光保存,建議將7-AAD染色液適當(dāng)分裝后-20℃保存。


注意事項(xiàng):
1. 為獲得的使用效果,請(qǐng)?jiān)?-6個(gè)月內(nèi)使用;

2. 染色后宜盡快檢測(cè),時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)導(dǎo)致凋亡或壞死細(xì)胞的數(shù)量增加;
3. 熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅,進(jìn)行熒光觀察時(shí),盡量縮短觀察時(shí)間,操作和存放過(guò)程中注意避光保存;
4. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

(本試劑產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或進(jìn)一步生產(chǎn)使用,不可用于臨床診斷或治療)


參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)列表
  • Engineering a Second-Order DNA Logic-Gated Nanorobot to Sense and Release on Live Cell Membranes for Multiplexed Diagnosis and Synergistic Therapy(2021.06.11)

    作者:Dan Wang,Shenhuan Li,Prof. Zilong Zhao

    期刊:Angew. Chem. Int. Ed.

    DOI:10.1002/anie.202103993

    影響因子 :15.336

    引用產(chǎn)品:P-CA-162

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