DNA/RNA通過凝膠電泳使之在凝膠中分離出來，通過加入標(biāo)準(zhǔn)核酸分子（markers）對其進(jìn)行鑒定，并用于轉(zhuǎn)膜、雜交等。 

【試劑】 
10×MOPS緩沖液： 
0.2mol/L MOPS（3-〔N-嗎啉〕丙磺酸） 
80mmol/L NaAc 
10mmol/L EDTANa2 
先用400 ml DEPC水溶解20.6g MOPS和4.1gNaAc后，加入10ml 0.5mol/L EDTA，定容500ml。用0.22mm濾器過濾除菌，避光保存。 
1×MOPS電泳緩沖液： 
10×MOPS 150ml 
37%甲醛 80ml 
加水至1500ml。 
甲醛凝膠變性RNA電泳加樣緩沖液（10×）： 
50％甘油 
1mmol/L EDTA 
0.25％溴酚藍(lán) 
0.25％二甲苯青FF 
5ml甘油、20ml 0.5mol/L EDTA、25mg溴酚藍(lán)、25mg二甲苯青FF，加DEPC水至10ml，高壓后，4°C保存。 
5mol/L EDTA（pH8.0） 
37％甲醛、甲酰胺等。 

【操作步驟】 
1． 電泳槽用0.3%H2O2浸泡30min，DEPC水沖洗晾干。 
2． 鋪膠（20ml） 
瓊脂糖 0.24g （1.2%） 
無RNase水 17.4ml 
10×MOPS 2.0ml 
37%甲醛 0.6ml 
EB 1ml 
將瓊脂糖加水融化后，加10×MOPS，待膠冷卻至60°C左右，再加甲醛和EB。（若鋪大膠可將上述各試劑的量加大2倍）。 
3． RNA樣品處理（以一條泳道為例） 
 
4．加2.0ml甲醛凝膠加樣緩沖液（10×） 
5．加樣和電泳 
將凝膠預(yù)電泳5min，電壓降為5v/cm。隨后加樣品和標(biāo)準(zhǔn)物，以3－4v/cm電壓降電泳，電泳液為1×MOPS電泳緩沖液。直至溴酚藍(lán)遷移至膠下游的3/4處。 
6． 電泳結(jié)束后，在紫外燈下，仔細(xì)測量28S rRNA和18S rRNA至加樣孔的距離，并同熒光尺一起拍照，以記錄標(biāo)準(zhǔn)物的位置。 

【注意事項(xiàng)】 
1． 每一泳道至多可分析30mg RNA，通常用10-20mg總RNA進(jìn)行Northern雜交，可以檢測高豐度mRNA（占mRNA總量的0.1%以上）；如待測RNA含量極微，每個泳道加0.5-3.0mg poly(A)+ RNA。 
2． 標(biāo)準(zhǔn)物28S rRNA»6333 base；18S rRNA»2366 base；9S兔b珠蛋白mRNA»710 base。 溴酚藍(lán)在前(»300bp)，二甲苯青FF在后(»4kb)。 

二、RNA樣品的轉(zhuǎn)膜（虹吸印跡法） 

【試劑】 
20×SSC：175.3g NaCl，88.2g檸檬酸鈉，DEPC水定容1000ml 
NaOH調(diào)pH至7.0，高壓后備用。 
6×SSC： 用20×SSC稀釋。 

【操作步驟】 
1． 將電泳后的凝膠用蒸流水漂洗2min，20×SSC浸泡30min。 
2．剪一與凝膠大小相等的硝酸纖維素膜，用蒸流水浸濕后放入20×SSC中。 
3．在方盤上放置一平板，其上放置一濾紙，濾紙兩端搭入盤內(nèi)浸入20×SSC中。 
4．將凝膠倒置于平臺上, 底面朝上，切掉右下角，并用保鮮膜封閉四周。 
5．將硝酸纖維素膜放于膠上，趕走氣泡。 
6．膜上放兩張濾紙，其上再放20層吸水紙。 
7．吸水紙上放一平板，其上放500g左右的重物。 
8．室溫下過夜轉(zhuǎn)膜，期間換紙2－3次。 
9．完成轉(zhuǎn)膜后，在紫外燈下觀察效果，并標(biāo)記好序號、加樣孔位置和28S，18S的位置。 
10．用6×SSC浸泡硝酸纖維素膜5分鐘，濾紙吸干，80°C烤箱真空干燥2小時。室溫保存。