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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動物細胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗培養(yǎng)基 軍團菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細胞
菌株
血清
細胞分離試劑
試劑盒

原代培養(yǎng)人前脂肪細胞的培養(yǎng)

時間:2014/11/10閱讀:743
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材料與試劑:  
鑷子、剪子、培養(yǎng)皿  
離心管、培養(yǎng)瓶、吸管、滴管  
200目篩網(wǎng)  
膠原酶(10ml)(20mg膠原酶、200mg牛血清白蛋白、10毫升雙蒸水)國外也用培養(yǎng)基配.  
方法:  
1、取無菌條件下新鮮切除的人腹部皮下脂肪組織約5-10克,放入培養(yǎng)皿,用1×PBS沖洗2-3次,充分洗去血污,剔除結(jié)締組織和可見血管。  
2、充分剪碎脂肪組織為1mm×1mm的小塊。  
3、將其加入到含有5毫升膠原酶的離心管里,37度水浴振蕩消化1小時。  
4、將含有組織的消化液加入到有10毫升DMEM/F12培養(yǎng)基的離心管中,并且使用吸管反復(fù)吹打使組織塊分散,然后通過孔徑25μM(200目)的篩網(wǎng)過濾,收集濾液和未過濾的組織塊。  
5、將濾液以600g離心5分鐘棄上清,加入原代培養(yǎng)的基礎(chǔ)培養(yǎng)基制成細胞懸液。  
6、將未濾過的組織按照上述過程再處理一次,將倆次獲得的細胞懸液混勻計數(shù),按照104個/cm2的密度接種于培養(yǎng)瓶里,于37度,5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。  
接種12-16小時基本貼壁。在增殖狀態(tài)下的前脂肪細胞可以使用消化的方法傳代,并且可以凍存和復(fù)蘇。 

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