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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗培養(yǎng)基 軍團菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

腺病毒系統(tǒng)重組技術(shù)

時間:2015/3/12閱讀:1154
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目前構(gòu)建重組腺病毒系統(tǒng)的策略,主要有三種

1)體外直接連接(clontech的ADENO-X系統(tǒng))

2)在細(xì)菌中重組的策略(adeasy系統(tǒng))

3)在293細(xì)胞中重組的策略(AdMax系統(tǒng))

國家人類基因組北方研究中心通過與美國Vector Biolab公司合作開發(fā)出了一套不同于以上策略的新的重組腺病毒系統(tǒng)。通過這套系統(tǒng),實現(xiàn)了重組腺病毒載體構(gòu)建,包裝的高通量化。在不到一年的時間里,成功構(gòu)建,包裝了500多個腺病毒。通過對穿梭載體,骨架載體,包裝細(xì)胞系的改進(jìn),提高了病毒的滴度,比目前其它腺病毒系統(tǒng)得到的滴度都高。而且可以包裝比較大的有毒性作用的基因。這套系統(tǒng)的建立無疑是對國內(nèi)基因治療領(lǐng)域的促進(jìn),提高了科研效率,降低了科研成本。

這套系統(tǒng)的解決了目前重組腺病毒系統(tǒng)的很多技術(shù)難題:

1. 提高了病毒的滴度。一次大規(guī)模擴增,純化得到的病毒量可以滿足上百只裸鼠實驗或幾十只大鼠實驗。

2. 可以包裝任何有細(xì)胞毒性的基因。針對腫瘤的基因治療經(jīng)常會選擇有細(xì)胞毒性的凋亡相關(guān)基因來實現(xiàn)殺傷腫瘤細(xì)胞的目的。這套系統(tǒng)解決了這樣的難題。

3. 可以包裝內(nèi)部有PacI位點的插入基因。大多系統(tǒng)都選擇PacI酶切線性化viral DNA,如果基因內(nèi)部有PacI位點往往給研究者帶來困難。

4. 縮短了重組腺病毒載體的構(gòu)建周期,而且可以開展大規(guī)模的載體構(gòu)建,病毒包裝項目。為研究者開展后續(xù)的實驗項目或者進(jìn)行更大,更具規(guī)?;目蒲许椖抗?jié)約了時間和成本。

5. 滴度測定更快,更準(zhǔn)確。一般的滴度測定方法,兩次重復(fù)實驗都會有很大的偏差,該系統(tǒng)優(yōu)化了滴度測定的條件,使得滴度測定工作只需要三天時間,兩次重復(fù)滴度測定偏差不超過40%。

6. 的包裝成功率。穿梭載體系統(tǒng)命名為pDual系列穿梭載體,Dual代表可與兩套病毒骨架載體兼容,用其中一套的包裝成功率為99%以上,在包裝500個腺病毒過程中只有一個沒有包裝成功。剩下的1%不好包的,不用再重新構(gòu)建穿梭載體就可以馬上換另一套系統(tǒng)。這樣降低了風(fēng)險,節(jié)省了客戶的時間。

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