摘要 我們知道生物大分子,如蛋白質(zhì)、核酸的特殊空間構(gòu)象的形成絕大多數(shù)是可逆的熱力學(xué)反應(yīng),因此對此過程的熱力學(xué)研究有著很大的意義。這個過程需要利用目標分子直接測量伴隨生物大分子反應(yīng)的熱效應(yīng)。實現(xiàn)這一程序需要具有很高靈敏度的量熱技術(shù),即差示掃描量熱技術(shù)(DSC)和等溫滴定量熱技術(shù)(ITC),得以測量在固定溶液環(huán)境下,隨溫度變化放出的熱量?;驕y量在固定溫度下,隨溶液環(huán)境變化放出的熱量。在本篇綜述中,我們主要介紹DSC和ITC的主要原理,以及它們在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。
關(guān)鍵詞 微量量熱技術(shù) 差示掃描量熱技術(shù) 等溫滴定量熱技術(shù) 生物大分子
正文
1.前言
在升溫和降溫的過程中,物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和化學(xué)性質(zhì)會發(fā)生變化,其質(zhì)量、幾何尺寸、光、電、磁、熱、力等物理性質(zhì)也會發(fā)生相應(yīng)的變化。微量量熱技術(shù)被定義為在溫度程序控制的條件下測量物質(zhì)的物理性質(zhì)和溫度關(guān)系的一類技術(shù)。
微量量熱技術(shù)是近年來發(fā)展起來的一種研究生物熱力學(xué)與生物動力學(xué)的重要結(jié)構(gòu)生物學(xué)方法,它通過高靈敏度、高自動化的微量量熱儀連續(xù)和準確地監(jiān)測和記錄一個變化過程的量熱曲線,同時提供熱力學(xué)和動力學(xué)信息。
微量量熱技術(shù)的一個重要特點就是,它可以作為任意反應(yīng)凈變的傳感器,具有連續(xù)性和抗干擾性。因此它是一個用于發(fā)現(xiàn)和估測反應(yīng)未知步驟或過程的分析技術(shù)。
2.差示掃描量熱技術(shù)(DSC)
差示掃描量熱技術(shù)是20世紀60年代以后研制出的一種熱分析方法。在樣品和參比物同時程序升溫或降溫且保持兩者溫度相同的條件下,測量流入或流出樣品和參比物的熱量差與溫度關(guān)系的技術(shù)。
DSC儀器結(jié)構(gòu)包括溫度程序控制系統(tǒng);測量系統(tǒng),用于樣品物理量轉(zhuǎn)換成電信號并放大;數(shù)據(jù)記錄、處理和顯示系統(tǒng);樣品室,提供適當環(huán)境。
DSC分析生物大分子結(jié)構(gòu)變化的基礎(chǔ):由于在給定溫度下每個體系總是趨向于達到自由能zui小的狀態(tài),所以樣品升溫或降溫的過程中,它可以轉(zhuǎn)變成具有不同自由能的另一種結(jié)構(gòu)狀態(tài)。分析伴隨著結(jié)構(gòu)變化所發(fā)生的焓變化,就可以得到樣品結(jié)構(gòu)變化的某些信息