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上海士鋒生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第14年

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標(biāo)準(zhǔn)品
培養(yǎng)基
培養(yǎng)基原料 霍亂弧菌診斷血清 大腸艾希氏菌診斷血清 志賀氏菌屬診斷血清 沙門氏菌屬診斷血清 標(biāo)準(zhǔn)血清,診斷血清 抗生素藥敏紙片 微生物配套試劑 微生物生化管 管裝培養(yǎng)基 即用型液體培養(yǎng)基 一次性培養(yǎng)基平板 顯色培養(yǎng)基 臨床培養(yǎng)基 菌種保存培養(yǎng)基 四環(huán)素檢定、厭氧亞硫酸鹽還原桿菌檢測培養(yǎng)基 維生素檢測培養(yǎng)基 一次性衛(wèi)生用品衛(wèi)生檢測培養(yǎng)基 罐頭食品商業(yè)無菌檢測培養(yǎng)基 飲用水及水源檢測培養(yǎng)基 藥品、生物制品檢測培養(yǎng)基 化妝品檢測培養(yǎng)基 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基 啤酒檢驗(yàn)培養(yǎng)基 軍團(tuán)菌檢測培養(yǎng)基 支原體檢測培養(yǎng)基 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 彎曲桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 產(chǎn)氣莢膜梭菌、肉毒梭菌、厭氧菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 阪崎腸桿菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 溶血性鏈球菌檢測培養(yǎng)基 李斯特氏菌檢測培養(yǎng)基 弧菌檢測培養(yǎng)基 乳酸菌、雙歧桿菌檢測培養(yǎng)基 酵母、霉菌檢測培養(yǎng)基 檢測培養(yǎng)基 沙門氏菌、志賀氏菌檢驗(yàn)培養(yǎng)基 大腸菌群、糞大腸菌群、大腸桿菌及腸桿菌科檢測培養(yǎng)基 細(xì)菌總數(shù)檢測,增菌培養(yǎng)基
抗體
生物試劑
細(xì)胞
菌株
血清
細(xì)胞分離試劑
試劑盒

urkat細(xì)胞(人外周血白血病T細(xì)胞)的傳代

時(shí)間:2014-11-5閱讀:1296
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urkat細(xì)胞(人外周血白血病T細(xì)胞),是一種懸浮細(xì)胞。我的經(jīng)驗(yàn)如下:

1、培養(yǎng)液:RPMI1640,15%小牛血清,2%Na2CO3,1%HEPES,100IU/1ml,100IU/ml;

2、培養(yǎng)條件:5%CO2,37度,30%濕度;

3、細(xì)胞復(fù)蘇:要快速將凍存管放入37度水中,不斷輕輕搖晃,直到細(xì)胞*溶解,加入10ml左右的培養(yǎng)液,800~1000rpm,10分鐘離心,之后倒掉液體,加入新的培養(yǎng)基就可以進(jìn)行培養(yǎng)了;

4、細(xì)胞培養(yǎng):起初進(jìn)行傳代時(shí)由于細(xì)胞剛剛復(fù)蘇,長得比較慢,所以可以3~4天傳一代,傳過兩代后,一般2~3天傳一代,每次傳代后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),在傳過幾代合適的時(shí)候可以進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

5、細(xì)胞凍存:1000rpm離心后,棄去液體,加入含有15%DMSO的凍存液,按下列順序降溫:室溫→4℃(20分鐘〕→冰箱冷凍室(30分鐘)→低溫冰箱(-80℃ 1小時(shí))→液氮。

6、我在做細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)的一些小經(jīng)驗(yàn):

(1)細(xì)胞培養(yǎng)箱在每使用1個(gè)月用酒精擦洗一次,這樣可以減少污染;

(2)雖然說加樣器放在紫外下照射會(huì)不準(zhǔn),但我們還是丟了一把1ml的加樣器在超凈臺(tái),沒有拿出來過,我想這樣也許會(huì)減少污染;

(3)小牛血清我們用的是國產(chǎn)的,所以在一開始的時(shí)候加了15%的小牛血清,但細(xì)胞總是長不好,后來摸索條件,把小牛血清的量調(diào)到了20%,細(xì)胞生長旺盛;

(4)HEPES雖然貴點(diǎn),但加上去后細(xì)胞會(huì)長的不錯(cuò);

(5)在超凈臺(tái)操作前要用0.1%的新潔爾滅或75%酒精擦手。

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