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當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實(shí)業(yè)有限公司>>生化測(cè)試盒>>谷胱系列>> 100管/96樣谷胱系列(GSH)還原酶(GR)測(cè)試盒_微量法

谷胱系列(GSH)還原酶(GR)測(cè)試盒_微量法

參  考  價(jià):面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)100管/96樣

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時(shí)間:2022-07-26 10:33:19瀏覽次數(shù):637次

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品牌 紀(jì)寧生物 貨期 現(xiàn)貨供應(yīng)
有效期 6個(gè)月 用途 僅供科研實(shí)驗(yàn)使用
谷胱系列(GSH)還原酶(GR)測(cè)試盒_微量法由上海紀(jì)寧生物公司提供,包括GR檢測(cè)試劑盒說明書,免費(fèi)代測(cè),規(guī)格,包裝,品牌等關(guān)于有關(guān)本司測(cè)試盒所有產(chǎn)品的詳細(xì)介紹

谷胱系列(GSH)還原酶(GR)測(cè)試盒_微量法

測(cè)定方法:微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

注    意:正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

測(cè)定意義:

GR是廣泛存在于真核和原核生物中的一種黃素蛋白氧化還原酶,是(GSH)氧化還原循環(huán)的關(guān)鍵酶之一(通常昆蟲中GR被TrxR取代)。GR催化NADPH還原GSSG生成GSH,有助于維持體內(nèi)GSH/GSSG比值。GR在氧化脅迫反應(yīng)中對(duì)活性氧清除起關(guān)鍵作用,此外GR還參與抗壞血酸-(GSH)循環(huán)途徑。

谷胱系列(GSH)還原酶(GR)測(cè)試盒_微量法

測(cè)定原理:

GR能催化NADPH還原GSSG再生GSH,同時(shí)NADPH脫氫生成NADP+;NADPH在340 nm有特征吸收峰,相反NADP+在該波長(zhǎng)無吸收峰;通過測(cè)定340 nm吸光度下降速率來測(cè)定NADPH脫氫速率,從而計(jì)算GR活性。


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自備儀器和用品:

低溫離心機(jī)、水浴鍋、移液器、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、和蒸餾水

試劑組成和配置:

試劑一:液體120mL×1瓶,4℃保存。

試劑二:粉劑×2支,-20℃保存。臨用前加入1.2mL蒸餾水,混勻。

試劑三:粉劑×2支,-20℃保存。臨用前加入0.6mL蒸餾水,混勻。

粗酶液提?。?br/>

1.組織:按照組織質(zhì)量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進(jìn)行冰浴勻漿。8000g,4℃離心15min,取上清,置冰上待測(cè)。

2.細(xì)菌、真菌:按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細(xì)胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時(shí)間3min);然后8000g,4℃,離心15min,取上清置于冰上待測(cè)。

3.血清等液體:直接測(cè)定。

操作步驟:

1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30 min,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm,蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑一置于25℃(普通物質(zhì))或者37℃(哺乳動(dòng)物)中預(yù)熱30min。

3. 測(cè)定管:取微量石英比色皿或96孔板,依次加入10μL試劑三,20μL試劑二,150μL試劑一,20μL上清液,混勻,于340nm迅速測(cè)定初始吸光度和180 s吸光度,記為A測(cè)1和A測(cè)2,△A測(cè)定管= A測(cè)1﹣A測(cè)2。


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