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  • 免疫組化ABC法操作步驟

    上海勁馬實驗設(shè)備有限公司提供專業(yè)免疫組化代測,專業(yè)elisa試劑盒供應商。訂購1、4%多聚甲醛常規(guī)灌注固定,取材并置20%蔗糖溶液(4℃)過夜,蠟塊制作,切片,貼片。0.01MPBS清洗5min×3次;2、脫蠟、水化:用二甲苯兩次10min,用梯度乙醇由低濃度到高濃度進行水化;3、加入0.3%的過氧化氫甲醇溶液(甲醇80ml+0.01MPBS100ml+30%過氧化氫)30min,以消除內(nèi)源性過氧化物酶的影響,0.01MPBS清洗5min×3次;4、加入0.3%TritonX-100(0.3ml
  • 免疫組化常見問題的處理

    當免疫組化染色沒有出現(xiàn)預期結(jié)果時,應系統(tǒng)地查找原因,而每一次只能排除一種可能的原因.對照/標本無染色①確認是否忽略了應該加的某種試劑,包括一抗、二抗、三抗及底物等.②確認所有的試劑是否按正確的順序加入,是否孵育了足夠的時間.③對照抗體的標簽確認是否使用了正確的抗體,以及所用的檢測系統(tǒng)是否和一抗匹配,這一點是非常重要的.比如,如果一抗是兔來源的抗體,二抗一定要用抗兔的二抗來匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必須是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗.④檢查抗體所使用的稀釋度及稀釋溶液.⑤檢查
  • 發(fā)現(xiàn)細胞信號分子IL-9抑制黑色素瘤生長

    黑色素瘤是一種zui為危險性的皮膚癌.美國布萊根婦女醫(yī)院(BrighamandWomen'sHospital,BWH)皮膚科主任ThomasS.Kupper博士和研究員RahulPurwar博士領(lǐng)導的一個研究小組取得一項突破性的發(fā)現(xiàn):免疫細胞中高表達的一種被稱作白細胞介素9(interleukin-9,IL-9)的細胞信號分子抑制黑色素瘤生長通過觀察缺乏負責免疫細胞---輔助性T細胞17(Thelpercell17,TH17)---發(fā)育的基因的小鼠,研究人員發(fā)現(xiàn)這些小鼠能夠顯著性地抵抗黑色素瘤生
  • 胰高血糖素檢測方法

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  • 全血RNA快速提取

    *次使用前請先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入量無水乙醇!使用前將10X紅細胞裂解液RLB用DEPC處理水稀釋到1X.操作前在裂解液RLT中加入β-巰基乙醇至終濃度1%,如1mlRLT中加入10μlβ-巰基乙醇.此裂解液現(xiàn)用現(xiàn)配.配好的RLT4℃可放置一個月.1.在適合大小的RNasefree離心管中加入1體積(0.5ml或者2x106白細胞,加30-50μlRNasefreewater重復步驟11,合并兩次洗脫液,或者使用*次的洗脫液加回到吸附柱重復步驟一遍(如果需要RNA濃度高).洗脫兩遍
  • 免疫組化的經(jīng)驗總結(jié)

    免疫組化的經(jīng)驗總結(jié),主要分享操作要點與技巧免疫組化是利用抗原與抗體特異性結(jié)合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學.免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體.操作要點和技巧1.固定:用4%的多聚甲醛固定液.對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液.有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書.BouinS
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