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酸性磷酸酶的顯示方法1.目的與原理實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆誄omori法的基本原理和方法。觀察酸性磷酸酶在細(xì)胞內(nèi)的分布狀況。實(shí)驗(yàn)原理：酸性磷酸酶能分解磷酸脂而釋放出磷酸基。在pH5．0的環(huán)境中，磷酸基能與鉛鹽反應(yīng)形成磷酸鉛。但因其是無色的，所以再經(jīng)過與硫化銨作用，形成棕黑色的硫化鉛沉淀，由此就能顯示酸性磷酸酶在細(xì)胞內(nèi)的存在與分布。本實(shí)驗(yàn)的技術(shù)特點(diǎn)是：（1）采用冷凍涂片和中性福爾馬林固定，可避免在固定、包埋及制片過程中酶的失活，保證了實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性。（2）采用較短的作用時間，可避免細(xì)胞質(zhì)內(nèi)其它蛋白質(zhì)及核內(nèi)出現(xiàn)
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細(xì)胞膜的通透性觀察實(shí)驗(yàn)原理和操作步驟
一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?.了解細(xì)胞膜對物質(zhì)通透性的一般規(guī)律。2.了解溶血現(xiàn)象及其發(fā)生機(jī)制。二、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜是細(xì)胞與環(huán)境進(jìn)行物質(zhì)交換的選擇通透性屏障。它是一種半透膜，可選擇性控制物質(zhì)進(jìn)出細(xì)胞。各種物質(zhì)出入細(xì)胞的方式是不同的，水是生物界zui普遍的溶劑，水分子可以按照物質(zhì)濃度梯度從滲透壓低的一側(cè)通過細(xì)胞膜向滲透壓高的一側(cè)擴(kuò)散，這種現(xiàn)象就是滲透。滲透作用是細(xì)胞膜的主要功能之一。將紅細(xì)胞放在低滲鹽溶液中，水分子大量滲到細(xì)胞內(nèi)，可使細(xì)胞脹破，血紅蛋白釋放到介質(zhì)中，由不透明的紅細(xì)胞懸液變?yōu)榧t色透明的血紅蛋白溶液，這 -
WesternBlot（免疫印跡法）步驟主要包括以下4個基本步驟：樣品制備；電泳分離；蛋白的膜轉(zhuǎn)移；免疫雜交與顯色――蛋白檢測。溶液和試劑1.1X磷酸鹽緩沖液（PBS）2.ModifiedRIPAbuffer：Tris-HCl:50mM,pH7.4；NP-40:1%；Na-deoxycholate:0.25%；NaCl:150mM；EDTA:1mM；PMSF:1mM；Aprotinin,leupeptin,pepstatin:1microgram/mleach；Na3VO4:1mM；NaF:1m
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凝膠電泳操作注意事項(xiàng)1.緩沖系統(tǒng)：在沒有離子存在時,電導(dǎo)率zui小,DNA不遷移,或遷移極慢,在高離子強(qiáng)度的緩沖液中,電導(dǎo)很高并產(chǎn)熱,可能導(dǎo)致DNA變性,因此應(yīng)注意緩沖液的使用是否正確.長時間高壓電泳時,常更新緩沖液或在兩槽間進(jìn)行緩沖液的循環(huán)是可取的.2.瓊脂糖：不同廠家、不同批號的瓊脂糖,其雜質(zhì)含量不同,影響DNA的遷移及熒光背景的強(qiáng)度,應(yīng)有選擇地使用.3.凝膠的制備：凝膠中所加緩沖液應(yīng)與電泳槽中的相一致,溶解的凝膠應(yīng)及時倒入板中,避免倒入前凝固結(jié)塊.倒入板中的凝膠應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡,影響電泳結(jié)果
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活細(xì)胞間接免疫熒光法實(shí)驗(yàn)操作方法一.實(shí)驗(yàn)器材：1.器材：40孔塑料板、40孔板離心機(jī)、微量加樣器、振蕩器、蓋玻片、熒光顯微鏡等。2.試劑：單抗隆抗體（單抗）、熒光標(biāo)記抗鼠免疫球蛋白、PBS（pH7.2-7.4）、甘油、疊氮鈉（NaN3）等。二.方法（微量法）1.將分離好的單個核細(xì)胞用PBS洗2次，1000rpm每次10分鐘。用含0.1%NaN3PBS調(diào)細(xì)胞濃度在0.5-1×108/ml（5000萬-1億/ml），加在40孔板上，每孔10ul，含5-10×105細(xì)胞，然后加入單抗（*抗體）50ul
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上海勁馬實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司專業(yè)供應(yīng)各種種屬蛋白elisa試劑盒，提供免費(fèi)代測服務(wù)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果客觀真實(shí)性。我公司對試劑盒質(zhì)量100%保證，若存在質(zhì)量問題，我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息，請來的咨詢：：業(yè)務(wù):何細(xì)胞分裂是機(jī)體發(fā)育和組織維持的基礎(chǔ)過程，巴塞羅那生物醫(yī)學(xué)研究所IRB和基因組調(diào)控中心CRG的一項(xiàng)研究證實(shí)，Nek9蛋白是細(xì)胞分裂的決定性因素。這項(xiàng)研究由巴塞羅那IRB研究者JoanRoig和CRG的IsabelleVernos領(lǐng)導(dǎo)，研究顯示細(xì)胞需要Nek9蛋白才能正確分配染色體，
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堿性成纖維生長因子（簡稱bFGF）是哺乳動物和人體內(nèi)存在的一種微量物質(zhì)，在多種組織細(xì)胞中分布有bFGF受體，因而其生理作用廣泛，是一種多功能細(xì)胞生長因子，bFGF于1974年首先由美國科學(xué)家Gospodarowicz從牛垂體中分離出，方法復(fù)雜，價格昂貴。現(xiàn)在運(yùn)用基因工程技術(shù)，由大腸桿菌可大量表達(dá)生產(chǎn)高活性、高純度的bFGF，從而使之大規(guī)模應(yīng)用于臨床。國內(nèi)外大量研究結(jié)果表明，bFGF通過促進(jìn)與創(chuàng)傷修復(fù)有關(guān)的幾乎所有細(xì)胞的迅速增殖而推動創(chuàng)面主動修復(fù)，顯著縮短創(chuàng)面愈合時間，全面提高創(chuàng)傷愈合質(zhì)量，特別是
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HSP0抗原呈遞的作用HSP70家族在抗原呈遞中扮演重要的角色。在腫瘤細(xì)胞表面的HSP70可以引發(fā)針對該腫瘤細(xì)胞的特異性免疫,并與DC（樹突狀細(xì)胞）抗腫瘤作用有關(guān)[6]。腫瘤細(xì)胞自身呈遞抗原效率非常低下,原因在于腫瘤細(xì)胞MHCI類分子往往低表達(dá)以及共同刺激分子缺乏,因此具有腫瘤特異性的CD4+和CD8+淋巴細(xì)胞的激活必須依賴于抗原提呈細(xì)胞的幫助，在由抗原呈遞細(xì)胞將內(nèi)源性抗原和外源性抗原,經(jīng)MHCⅠ類分子途徑和MHCⅡ類分子途徑,分別將抗原信息呈遞給CD8+T淋巴細(xì)胞和CD4+T淋巴細(xì)胞,通過NK
