產(chǎn)品名稱：鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
英文名稱：Abalone Herpes-like Virus(AbHV)
貨號(hào)：XG01P3211
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

實(shí)時(shí)定量PCR：
①β-actin陽(yáng)性模板的標(biāo)準(zhǔn)梯度制備 陽(yáng)性模板的濃度為1011，反應(yīng)前取3μl按10倍稀釋（加水27μl并充分混勻）為1010，依次稀釋至109、108、107、106、105、104，以備用。
②反應(yīng)體系如下：
標(biāo)準(zhǔn)品反應(yīng)體系
序號(hào)  反應(yīng)物  劑量
1   SYBR Green 1 染料  10μl
2  陽(yáng)性模板上游引物F  0.5μl
3  陽(yáng)性模板下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  陽(yáng)性模板DNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。

基因反應(yīng)體系：
序號(hào)  反應(yīng)物  劑量
1  SYBR Green 1 染料  10μl
2  內(nèi)參照上游引物F  0.5μl
3  內(nèi)參照下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  待測(cè)樣品cDNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。
③制備好的陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品和檢測(cè)樣本同時(shí)上機(jī)，反應(yīng)條件為：93℃　2分鐘，然后93℃ 1分鐘，55℃ 2分鐘，共40個(gè)循環(huán)。
PCR特異性：
1.primers design
這是重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件：
1)足夠長(zhǎng)，18～24bp，以保證特異性，當(dāng)然，不是說(shuō)越長(zhǎng)越好，太長(zhǎng)的primer同樣會(huì)降低特異性，并且降低產(chǎn)量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中間序列要多GC，以增加穩(wěn)定性；
4)避免3'端GCrich，個(gè)BASE不要有GC，或者5個(gè)有3個(gè)不要是GC。
5)避免3'端的互補(bǔ)，否則，容易造成DIMER；
6)避免3'端的錯(cuò)配；
7)避免內(nèi)部形成二級(jí)結(jié)構(gòu)；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值時(shí)不算，但在檢測(cè)互補(bǔ)和二級(jí)結(jié)構(gòu)要加上它們；
9)使用兼并primer時(shí)，要參考密碼子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用較高的primer濃度(1μM～3μM)；
10)學(xué)會(huì)使用一種design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al。
Rhesus antibody Rh PCANAP2/Prostein  前列腺癌相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格  0.2ml
Rhesus antibody Rh P-cadherin  P-鈣粘附分子抗體 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBR/DBI/TSPO  外周苯二氮受體抗體 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBOV1  前列腺癌和乳腺癌高表達(dá)蛋白抗體 規(guī)格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PBLD/MAWBP  MAWD結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PBK/TOPK  PDZ連接激酶/T-LAK細(xì)胞源蛋白激酶抗體 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF1(CT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF(NT)  內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素抗體（N端） 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PBEF (CT)  內(nèi)脂素/前B細(xì)胞克隆增強(qiáng)因子-2（C端抗體） 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh Paxillin  樁蛋白Paxillin抗體 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX9  配對(duì)盒基因9抗體 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX8  配對(duì)盒基因8抗體 規(guī)格  0.1ml
Rhesus antibody Rh PAX7  配對(duì)盒基因7抗體 規(guī)格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX6  轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體 規(guī)格  0.2ml
Rhesus antibody Rh PAX5  配對(duì)盒基因5抗體 規(guī)格  0.1ml用于大腸桿菌的甲基紅和VP試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Methyl Red Voges Proskauer Broth MR-VP培養(yǎng)基     
用于大腸菌群的固體平板檢測(cè)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Violet Red Bile Agar 結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂 (VRBA)    
用于腸道菌的檸檬酸鹽利用試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Simmons Citrate Agar 西蒙氏枸櫞酸鹽瓊脂     
用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法) Violet Red Bile Dextrose Agar   腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂 (VRBDA)     
用于常用細(xì)菌斜面?zhèn)鞔笆覝乇４?Strain Store Medium 菌種保存培養(yǎng)基   
用于飲用水，水源水中總大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn)) Lactose Peptone Broth 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液    
用于運(yùn)送腸道致病菌標(biāo)本 Cary-Blair Transport Medium Cary-Blair 氏運(yùn)送培養(yǎng)基       
營(yíng)養(yǎng)非常豐富，用各種細(xì)菌的基礎(chǔ)培養(yǎng)基(AFNOR EP IDF標(biāo)準(zhǔn)) Columbia Blood Agar Base 哥倫比亞血瓊脂基礎(chǔ)
用于飲用天然礦泉水中大腸桿菌的檢驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) Brilliant Green Lactose Medium 亮綠乳糖培養(yǎng)基   
用于腸道菌的增菌培養(yǎng)(GB、FDA標(biāo)準(zhǔn)) Enterobacteria Enrichment Broth 腸道菌增菌肉湯(EE肉湯)   
用于細(xì)菌總數(shù)測(cè)定 TTC Nutrient Agar TTC營(yíng)養(yǎng)瓊脂   
用于細(xì)菌培養(yǎng) LB Broth LB肉湯    
用于細(xì)菌培養(yǎng) LB Nutrient Agar LB營(yíng)養(yǎng)瓊脂   
用于苯脫氨酶試驗(yàn) Phenylalanine Deaminase  Medium 苯脫氨酶培養(yǎng)基   
用于大腸桿菌的熒光檢測(cè)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Columbia- MUG Medium 哥倫比亞MUG培養(yǎng)基
用于海生細(xì)菌的培養(yǎng)和計(jì)數(shù) 2216E　Agar 2216E瓊脂
用于腸球菌和腸道致病菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar) 腸球菌瓊脂(膽鹽－七葉苷－疊氮鈉瓊脂)
鮑皰疹樣病毒探針?lè)晒舛縋CR試劑盒用于培養(yǎng)擬桿菌 BDS Medium BDS培養(yǎng)基
用于細(xì)菌的綜合生化試驗(yàn) Dextrose Agar 葡萄糖瓊脂
用于細(xì)菌的糖發(fā)酵試驗(yàn) Andrade’s Carbohydrate Broth Andrade氏糖類肉湯
用于細(xì)菌枸椽酸鹽試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) Korser Citrate Sodium Broth Korser氏枸椽酸鹽肉湯
用于大腸菌群的確診試驗(yàn)(APHA) Endo Agar Endo 培養(yǎng)基
 熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟：
①取凍存已裂解的細(xì)胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí)，先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值，測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。