產品名稱：波氏奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Ostertagia podjapolskyi
貨號：XG01P3924
分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

實時定量PCR：
①β-actin陽性模板的標準梯度制備 陽性模板的濃度為1011，反應前取3μl按10倍稀釋（加水27μl并充分混勻）為1010，依次稀釋至109、108、107、106、105、104，以備用。
②反應體系如下：
標準品反應體系
序號  反應物  劑量
1   SYBR Green 1 染料  10μl
2  陽性模板上游引物F  0.5μl
3  陽性模板下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  陽性模板DNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。

基因反應體系：
序號  反應物  劑量
1  SYBR Green 1 染料  10μl
2  內參照上游引物F  0.5μl
3  內參照下游引物R  0.5μl
4  dNTP  0.5μl
5  Taq酶  1μl
6  待測樣品cDNA  5μl
7  ddH2O  32.5μl
8  總體積  50μl
輕彈管底將溶液混合，6000rpm短暫離心。
③制備好的陽性標準品和檢測樣本同時上機，反應條件為：93℃　2分鐘，然后93℃ 1分鐘，55℃ 2分鐘，共40個循環(huán)。
PCR特異性：
1.primers design
這是重要的一步。理想的，只同目的序列兩側的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面一些條件：
1)足夠長，18～24bp，以保證特異性，當然，不是說越長越好，太長的primer同樣會降低特異性，并且降低產量；
2)GC%，40%~60%；
3)5'端和中間序列要多GC，以增加穩(wěn)定性；
4)避免3'端GCrich，個BASE不要有GC，或者5個有3個不要是GC。
5)避免3'端的互補，否則，容易造成DIMER；
6)避免3'端的錯配；
7)避免內部形成二級結構；
8)附加序列(RT site，Promoter sequence)加到5'端，在算Tm值時不算，但在檢測互補和二級結構要加上它們；
9)使用兼并primer時，要參考密碼子使用表，注意：生物偏好性，不要在3'端使用兼并primer，并使用較高的primer濃度(1μM～3μM)；
10)學會使用一種design software，PP5，Oligo6，DNA star，Vector NTI，Online design et al

A172(人腦膠質瘤細胞)5×106cells/瓶×2

NZCYM瓊脂/NZCYM AgarBR100克國產/進口

中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

東京根霉 Rhizopus tonkinensis蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

敘利亞倉鼠腎細胞泡盛曲霉 Aspergillus awamori

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna慶豐鏈霉菌 Streptomyces qingfengmyceticus

293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系苜蓿中華根瘤菌

人肺腺細胞巨大芽胞桿菌 Bacillus megaterium

好食脈孢菌 Streptomyces venezuelae var.spiralis粘質沙雷氏菌 Serratia marcescens

A2780(人卵巢細胞)A3(人T淋巴細胞白血病細胞)

Poly-D-lysine溶液戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus

糖丁酸梭菌 Clostridium saccharobutyricum蘇云金芽孢桿菌 Bacillus thuringiensis

HBL-100(人整合SV40基因的腺上皮細胞)煙曲霉 Aspergillus fumigatus
波氏奧斯特線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒人基質金屬蛋白酶25(MMP25)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒10240

IL17A Protein Mouse 重組小鼠 IL17 / IL17A 蛋白

川芎嗪  英文名稱：Ligustrazine phosphate   保存：20℃  00mg PDZ結構域PDZK8蛋白體

人基質金屬蛋白酶10(MMP10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒10415

小鼠視網膜色上皮細胞*培養(yǎng)00mL 207511102化學試載脂蛋白L5(APOL5)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)

蛋白酶(進口) 質量國進口 Antipain di 彩虹預染中分子量蛋白Marker小鼠腸微血管細胞*培養(yǎng)

人基質金屬蛋白酶12(MMP12)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒11123149001

138523化學試載脂蛋白L4(APOL4)檢測試盒(酶免疫吸附試驗法)

桑根C  英文名稱：Sanggenon C   保存：20℃   HPLC≥98%0mg/支 化馬鈴薯球蛋白體

熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混勻后，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。