收到細胞如何處理？

1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株；(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項；3、公司售后服務標準。

      保存和應用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞，如是新鮮細胞株，客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞，客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研，不得用于臨床應用。

細胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細胞懸浮生長。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二． 細胞處理：
1） 復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2） 細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

3-Fluoroaniline酮中硫線溶液標準物質anti- AIP/ARA9 antibody人生長激素結合蛋白(GHBP)ELISA試劑盒

LEAD(II) ARSENATE酮中碘硫溶液標準物質anti- AIPL1 antibody人腎上腺髓質素(ADM)ELISA試劑盒

Trifluoroacetylacetone;1,1,1- Trifluoro acetyl acetone;TAA酮中伐滅溶液標準物質anti- AIRE antibody人免疫反應性生長激素(irGH)ELISA試劑盒

Bis(cyclopentadienyl)zirconium chloride hydride酮中氯唑溶液標準物質anti- Ajuba antibody人雌激素受體(ER)ELISA試劑盒

acetic acid: trimethyltin酮中苯線溶液標準物質anti- AK1 antibody人糖皮質激素受體β(GR-β)ELISA試劑盒

α-Ketoglutaric acid;2-Oxopentanedioic acid;2-Oxo-1,5-pentanedioic acid酮中吡菌溶液標準物質anti- AK2 antibody人糖皮質激素受體α(GR-α)ELISA試劑盒

3-METHOXYMETHYLDOPA酮中二溴溶液標準物質anti- AK2 antibody人高敏三碘狀腺原氨酸(u-T3)ELISA試劑盒

(-)-EPICATECHIN(2-8℃)酮中乙拌溶液標準物質anti- AK3 antibody人黃體生成素釋放激素(LHRH)ELISA試劑盒

NR8383大鼠肺泡巨噬細胞Human MUC2 (Mucin 2) ELISA Kit酸化細胞分裂周期蛋白6抗體anti- PGLYRP2 antibody髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit酸化周期素依賴激酶2抗體anti- PGLYRP3 antibody髓細胞觸發(fā)受體1(TREM1)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CNR1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit 緊密連接蛋白8抗體anti- PGLYRP4 antibody雙調(diào)蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit濃縮素2復合亞基D3抗體anti- PGM1 antibody雙調(diào)蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CA125 (Carbohydrate Antigen 125) ELISA Kit  著絲粒蛋白T抗體anti- PGM1 antibody雙調(diào)蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CA19-9 (Carbohydrate antigen19-9) ELISA Kit染色體相關蛋白2抗體anti- PGM2 antibody雙調(diào)蛋白(AREG)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CDT (Carbohydrate Deficient Transferrin) ELISA Kit著絲粒蛋白P抗體anti- PGM2L1 antibody胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

Human CA1 (Carbonic Anhydrase I) ELISA Kit 細胞分裂周期相關蛋白5抗體anti- PGP antibody胰島素樣生長因子2(IGF2)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)

公司產(chǎn)品采用干冰運輸，經(jīng)過逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時停止其生命活動，保存其活性，使您的實驗更生動,公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

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