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上海西格生物科技有限公司
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MRC-5人胚肺成纖維細(xì)胞

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2020-10-19 10:04:55瀏覽次數(shù):269次

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 產(chǎn)品名稱(chēng)

 規(guī)格

 貨號(hào)

 MRC-5人胚肺成纖維細(xì)胞

 T25m2

XG-X6350

      描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨:客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基;2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用:客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。

 

冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。

收到細(xì)胞如何處理?

1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。
公司產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸,經(jīng)過(guò)逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時(shí)停止其生命活動(dòng),保存其活性,使您的實(shí)驗(yàn)更生動(dòng),公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

(-)-Diisopinocampheyl chloroborane酮中乙烯利溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AGXT2L2 antibody人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)ELISA試劑盒

(-)-ALPHA-CUBEBENE酮中溴螨酯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHCY antibody人庚型肝炎病IgM(HGV-IgM)ELISA試劑盒

1-Naphthaldehyde;酮中克菌丹溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHCY antibody人戊型肝炎病IgM(HEV-IgM)ELISA試劑盒

AMMoniuM citrate dibasic;AMMoniuM hydrogen citrate;Citric acid diaMMoniuM salt酮中草胺溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHCYL1 antibody人戊型肝炎病IgG(HEV-IgG)ELISA試劑盒

tributyl(lauroyloxy)stannane酮中硫克威溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHI1 antibody人型肝炎IgM(HDV IgM)ELISA試劑盒

PHENANTHROLINE RUTHENIUM DICHLORIDE, HYDRATE酮中硫克威溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHNAK antibody人型肝炎IgG(HDV IgG)ELISA試劑盒

AMMONIUM SALICYLATE酮中稻散溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHR antibody人型肝炎IgM(HCV-IgM)ELISA試劑盒

PALLADIUM(II) NITRATE HYDRATE酮中敵稗溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)anti- AHSA1 antibody人型肝炎IgG(HCV-IgG)ELISA試劑盒

MRC-5人胚肺成纖維細(xì)胞Human MUC1 (Mucin 1) ELISA Kit乳腺腫瘤新因子1抗體anti- PFKP antibody干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CABIN1 (Calcineurin Binding Protein 1) ELISA Kit 25α7羥化酶抗體anti- PFN2 antibody干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CaN (Calcineurin) ELISA Kit24羥化酶抗體anti- PFTK1 antibody干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CGRP (Calcitonin Gene Related Peptide) ELISA Kit細(xì)胞角蛋白3+12抗體anti- PGAM1 antibody干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CTR (Calcitonin Receptor) ELISA Kit 細(xì)胞色素P450 17抗體anti- PGAM1 antibody干細(xì)胞因子(SCF)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CaSR (Calcium Sensing Receptor) ELISA Kit 細(xì)胞色素P450 7A1抗體/7a羥化酶anti- PGAM2 antibody基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1(SDF1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CACYBP (Calcyclin Binding Protein) ELISA Kit 碳酸酐酶9抗體anti- PGAM2 antibody轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CALD (Caldesmon) ELISA Kit酸化細(xì)胞周期檢測(cè)點(diǎn)激酶2抗體anti- PGAP1 antibody轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGFα)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

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