使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見(jiàn)下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏，還具有以下特點(diǎn)：
1.  即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

ThiosulfateCitrateBileSaltsSucroseAgar

Medium-sulfurbacteria

RVS 肉湯 RVS Broth 250 用于食品中沙門氏菌檢驗(yàn)選擇性增菌(ISO標(biāo)準(zhǔn))

胰化大豆堅(jiān)固綠瓊脂(TSFA)250g/瓶用于濾膜法細(xì)菌總數(shù)測(cè)定incubationmedia胰化大豆堅(jiān)固綠瓊脂(TSFA)250g/瓶用于濾膜法細(xì)菌總數(shù)測(cè)定

StuartTransportMediumLST發(fā)酵管（含小導(dǎo)管）10ml*20支/包每管10ml  進(jìn)口分裝  標(biāo)準(zhǔn)溶液(1.00mg/mL,基體：)  -methyl solution  ：    質(zhì)量規(guī)格：  1.00mg/mL,基體：

緩沖MUG瓊脂100g用于濾膜MUG法檢測(cè)食品中大腸桿菌數(shù)(SN/T1059.2)  進(jìn)口分裝  雙三乙酰胺(>98.0%(N))  Bistri  ：  407-24-9  質(zhì)量規(guī)格：  >98.0%(N)

CCFAAgarBase  進(jìn)口分裝  庚烷(>99.0%(GC))  Heptane  ：  142-82-5  質(zhì)量規(guī)格：  >99.0%(GC)

BrainHeartInfusionBroth  進(jìn)口分裝  2,4,6-三(五乙基)-1,3,5-三嗪(>95.0%(GC))  2,4,6-3(pentafluoroethyl)-1,3,5-tri  ：  858-46-8  質(zhì)量規(guī)格：  >95.0%(GC)APOA1 Others Mouse 小鼠 ApoA1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

胰腺星狀細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

大鼠成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

Lec1倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞 Lec1 Chinese hamster ovary cells MEMα培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS

IGFBP5 Protein Canine 重組狗 IGFBP5 / IGFBP-5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EB (NBL-4) (牛胚氣管細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 大鼠垂體細(xì)胞RPC
田鼠痘病毒PCR檢測(cè)試劑盒硫乙醇酸鹽平板培養(yǎng)基70mm

豇豆慢生根瘤菌

糞腸球菌

短裙竹蓀東北變種

新月彎孢霉

弗氏檸檬酸桿菌N-本基代鄰安基本加醋 N-Phqnylcnthrcnilic ccid 91-40-7

FERRICSULFATEHYDRATE鐵,無(wú)水試劑級(jí)黃色精細(xì)結(jié)晶粉末RTsigma

亞肖醋鉀(*) POTcSSIUM nitnITq 7728-09-0

銀杏葉//Ginkgo biloba BR 1克 國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口

改良巴氏染液/Modified papanicolaou stain BR 50毫升×5;100毫升×1 國(guó)產(chǎn)CD6 Others Mouse 小鼠 CD6 / TP120 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0927

MuM-2C 人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞

hFOB 1.19人SV40轉(zhuǎn)染成骨細(xì)胞 The hFOB 1.19 SV40 was ansfected io osteoblasts DMEM/F12(1:1)+10% FBS+300μg/ml G418

THPO Protein Human 重組人 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白 (His 標(biāo)簽)

人胎兒胸腺細(xì)胞株;HFT-8810 [HFT8810] 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。