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免疫組化中抗體選擇要求2009/12/15: 免疫組化中抗體選擇要求1、一抗選擇要點(diǎn)（1）選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產(chǎn)生的特異性抗體叫做單克隆抗體，單克隆抗體能目標(biāo)明確地與單一特異抗原決定簇結(jié)合，就象導(dǎo)彈地命中目標(biāo)一樣。另一方面，即使是同一個(gè)抗原決定簇，在機(jī)體內(nèi)也可以由好幾種克隆產(chǎn)生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應(yīng)中，一般單克隆抗體特異性強(qiáng)，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對較低；而多克隆抗體特異性稍弱，抗體的親和力強(qiáng)，靈敏度高，但易出現(xiàn)非特異性染色（可以通過封閉等有所避免）。（2）種屬來源。一般家

影響ELISA實(shí)驗(yàn)的因素和對策2009/12/15: 影響ELISA試驗(yàn)效果常見問題原因分析及解決辦法來自Transhold跳轉(zhuǎn)到:導(dǎo)航,搜索ELISA試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在科研上得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對試驗(yàn)的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果。下面將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下：操作步驟：目錄[隱藏]1選擇試劑：2標(biāo)本收集與保存：3試劑使用中的準(zhǔn)備工作及注意事項(xiàng)：4加樣：5溫育：6洗板：7顯色：8終止：9讀板：10全過程：11ELISA實(shí)驗(yàn)的結(jié)果判斷和數(shù)據(jù)分析選擇試劑：選擇質(zhì)

使用抗生素的“三大紀(jì)律”2009/12/15: 和人類一樣，我們微生物之間，也會相互殘殺。某些微生物在生長繁殖過程中，產(chǎn)生的代謝物，能夠抑制其他微生物的生長繁殖。人類把微生物殘殺微生物的現(xiàn)象叫做抗生。19世紀(jì)中期，zui早指出細(xì)菌就是導(dǎo)致傳染病病原的法國科學(xué)家，把抗生叫做“生命抑制了生命”。到了1889年，一位法國化學(xué)家，*次把微生物之間相互殘殺的武器（抗體和活性類代謝物）叫做抗生素。目前已經(jīng)被人類發(fā)現(xiàn)的天然抗生素有上萬種。其中有許多，比如青霉菌產(chǎn)生的青霉素、灰色鏈絲菌產(chǎn)生的鏈霉素，被人類利用了，用來抗生素藥物以殺滅對他們有害的微生物。生物之

小鼠胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)步驟2009/12/15: 一般培養(yǎng)-保持胚胎干細(xì)胞處于未分化狀態(tài)培養(yǎng)基細(xì)胞復(fù)蘇凍存細(xì)胞明膠包被細(xì)胞傳代體外分化培養(yǎng)基包被有多聚鳥氨酸/纖維結(jié)合蛋白的培養(yǎng)板（使用或不使用蓋玻片）體外分化方法注：以下培養(yǎng)針對于小鼠的R1胚胎干細(xì)胞系，其它胚胎干細(xì)胞的培養(yǎng)可以參考。不過人的胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)不可以采用下面的protocol，需要用的protocol和培養(yǎng)基。一般培養(yǎng)--維持ES細(xì)胞處于未分化狀態(tài)ES細(xì)胞培養(yǎng)用含有LIF（白血病抑制因子）和Feed細(xì)胞的培養(yǎng)基（高糖）來阻止細(xì)胞的分化。為細(xì)胞提供包被有0.1％明膠的平板作為粘附細(xì)胞的

常用試劑的性質(zhì)與制備純化2009/12/14: 1．氨氣商品的氨氣一般用鋼瓶盛裝，使用時(shí)通過減壓裝置可以得到氣態(tài)的氨。氣體的流速可由計(jì)泡計(jì)來控制，其中計(jì)泡計(jì)中含有少量濃氫氧化鉀溶液（12g氫氧化鉀溶于12mL水）。在計(jì)泡計(jì)和反應(yīng)器之間應(yīng)加一安全瓶。通過裝有疏松的堿石灰或塊狀氧化鈣的干燥塔干燥。如果需要少量的氨可以用如下方法制備：在上端裝有回流冷凝管的圓底燒瓶中加入濃氨水，緩慢加熱，氣體通過裝有疏松的堿石灰或塊狀氧化鈣的干燥塔干燥，然后通過安全瓶引入反應(yīng)瓶。2．氨基鈉市售顆粒狀氨基鈉純度為80～90%，氨基鈉不容易研碎，通常在裝有烴類惰性溶劑（

生物學(xué)中常用的試劑你知道幾種2009/12/08: 斐林試劑:成分:0.1g/mlNaOH（甲液）和0.05g/mlCuSO4（乙液）.用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色.班氏糖定性試劑:為藍(lán)色溶液.和葡萄糖混合后沸水浴會出現(xiàn)磚紅色沉淀.用于尿糖的測定.雙縮脲試劑:成分:0.1g/mlNaOH（甲液）和0.01g/mlCuSO4（乙液）.用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測中存在蛋白質(zhì),則呈現(xiàn)紫色.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹

RD 人脫氧吡啶酚 500ng 中文說明書2009/12/02: SYSTEMS®中文說明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________人（Human）脫氧吡啶酚（DPD）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清或血漿試驗(yàn)原理：DPD試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知DPD濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)

兔抗人神經(jīng)肽Y 中文說明書 2009/11/30: SYSTEMS®中文說明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________兔（Rabbit）神經(jīng)肽Y（NPY）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：NPY試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知NPY濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先

核酸疫苗的概念及其給藥方法2009/11/25: 核酸疫苗是將編碼某種抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA）直接導(dǎo)入動(dòng)物體細(xì)胞內(nèi),并通過宿主細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)合成抗原蛋白,誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對該抗原蛋白的免疫應(yīng)答,以達(dá)到預(yù)防和治療疾病的目的。核酸疫苗的本質(zhì)是含有病原體抗原基因的真核表達(dá)載體，當(dāng)它被導(dǎo)入動(dòng)物機(jī)體后，可被動(dòng)物細(xì)胞所攝取并表達(dá)病原體的抗原蛋白，從而誘導(dǎo)機(jī)體對該蛋白的免疫反應(yīng)。關(guān)于核酸疫苗誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的機(jī)理目前了解的還不十分清楚。一般認(rèn)為核酸疫苗通過肌肉注射或基因槍（一種將DNA吸附于細(xì)微的金顆粒表面通過高壓氣流將DNA導(dǎo)人機(jī)體皮下的方式）導(dǎo)入機(jī)體

獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑盒備案參考評判標(biāo)準(zhǔn)2009/11/23: 獸藥殘留酶聯(lián)免疫試劑盒備案參考評判標(biāo)準(zhǔn)1、標(biāo)準(zhǔn)曲線定量方法：標(biāo)準(zhǔn)曲線至少由5個(gè)濃度組成，測定次數(shù)不少于5次，以確定工作濃度范圍和IC50范圍。定性方法：工作濃度范圍通過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來確定，每個(gè)濃度重復(fù)不少于5次，濃度與響應(yīng)值之間應(yīng)有一定的關(guān)系。2、檢測限和定量限檢測限：20份空白樣品測定均值加3倍標(biāo)準(zhǔn)差。定量限：應(yīng)大于標(biāo)準(zhǔn)曲線中zui低濃度點(diǎn)。對于定量方法，應(yīng)對該濃度樣品至少測定6次進(jìn)行驗(yàn)證，而不能通過外延法推斷。3、臨界值（cut-off值）的確定對于有zui高殘留*的藥物

15種蛋白質(zhì)單晶培養(yǎng)的方法2009/11/23: 要培養(yǎng)蛋白質(zhì)單晶，必須在蛋白質(zhì)溶液，添加鹽類和沈淀劑，調(diào)整pH值和溫度，再將部份水分蒸發(fā)，使蛋白質(zhì)溶液達(dá)過飽和，緩慢沈積，產(chǎn)生晶核（nucleation），慢慢長成夠大的單晶。X光源的強(qiáng)弱限制單晶的大小：對同步輻射光源而言，0.1mm的單晶就夠作X光繞射實(shí)驗(yàn)；轉(zhuǎn)靶式X光則用0.3mm以上的單晶尺寸;封管式的X光得用0.4mm以上的單晶較合適。有時(shí)候單晶含重原子也可犧牲尺寸。以上所列的尺寸只供較佳范圍的參考，特例不能*排除。（1）大量養(yǎng)晶法（bulkcrystallization）：若急著養(yǎng)出單晶

RD雞白介素 IL-2中文說明書 300pg2009/11/23: SYSTEMS®中文說明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________雞（Chicken）白介素2（IL-2）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：IL-2試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知IL-2濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行

PCR實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)2009/11/20: PCR實(shí)驗(yàn)要注意以下幾點(diǎn)：1.PCR引物設(shè)計(jì)：引物設(shè)計(jì)可能是PCR擴(kuò)增成功zui關(guān)鍵的因素。如引物設(shè)計(jì)欠佳，可能導(dǎo)致擴(kuò)增產(chǎn)物不足，甚至擴(kuò)增失敗，其原因是設(shè)計(jì)欠佳的引物可導(dǎo)致非特異擴(kuò)增和/或形成引物二聚體，此又成為PCR反應(yīng)的競爭性產(chǎn)物，從而進(jìn)一步抑制PCR產(chǎn)物形成。在引物設(shè)計(jì)時(shí)必須考慮以下幾個(gè)因素，其中zui重要的是引物長度、溶解溫度（Tm）、特異性、引物序列互補(bǔ)問題、G/C含量和多嘧啶（T,C）或多嘌呤（A,G）延伸、3’-末端序列等。（1）引物長度：由于PCR反應(yīng)的特異性、退火溫度以及時(shí)間均

RD 人轉(zhuǎn)移趨化生長因子beta1 中文說明書 2009/11/20: SYSTEMS®中文說明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________人（Human）轉(zhuǎn)移趨化生長因子beta1（TGF-beta1）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：TGF-beta1試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知TGF-beta1濃度

免疫組化試劑盒介紹2009/11/20: 免疫組化SP法試劑盒用途：用于體外診斷。Histostain®-Plus試劑盒用于檢測與人體組織或細(xì)胞標(biāo)本適用范圍：冰凍切片和石蠟包埋組織切片，新準(zhǔn)備好的淋巴細(xì)胞，和固定的培養(yǎng)細(xì)胞都可使用。免疫組化試劑盒原理：早在1987年Zymed公司引入Histostain®-SP檢測試劑盒。LAB-SA（也叫做鏈親和素-生物素放大體系）被*為是免疫組化的監(jiān)測方法。LAB-SA的方法學(xué)已經(jīng)在基礎(chǔ)研究和平常的試驗(yàn)中廣泛應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)流程：被石蠟包埋的組織切片在二甲苯中脫去石蠟并逐級水化后，進(jìn)行內(nèi)源性的過氧化物酶淬

紫外線消毒器優(yōu)勢和原理2009/11/18: 紫外線能較經(jīng)濟(jì)地解決兩蟲（隱孢子蟲、賈第蟲）問題。國外一般采用生飲水，水中隱孢子蟲的存在、人們對水安全認(rèn)識的提高以及有關(guān)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)的制定成為近幾年紫外消毒在市政飲用水廠得到大規(guī)模應(yīng)用的主要原因（紫外可以殺死隱孢子蟲），中國目前新的水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)也已將隱孢子蟲和賈第蟲列入。它有如下幾點(diǎn)優(yōu)勢：1、率殺菌:紫外線對細(xì)菌、病毒的殺菌使用一般在一至二秒即可達(dá)到99%－99.9%的殺菌率。2、殺菌廣譜性:紫外線殺菌的廣譜性是zui高的，它對幾乎所有的細(xì)菌、病毒都能率殺滅。3、無二次污染:紫外線殺菌不加入任何化學(xué)藥劑

人（Human）血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）ELISA檢測試劑盒2009/11/18: SYSTEMS®中文說明書UNIONHONEST酶聯(lián)免疫吸附測試EnzymelinkedlmmunosorbentAssay_____________________________________________________________________________________人（Human）血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子（VEGF）ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：VEGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知VEGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)

關(guān)于酶點(diǎn)（ELISPOT）技術(shù)的相關(guān)知識2009/11/16: 酶點(diǎn)（ELISPOT）技術(shù)是zui近幾年發(fā)展起來應(yīng)用于抗病毒免疫和抗腫瘤免疫的一種新型測定方法。Sanquin提供的顆粒酶-B酶點(diǎn)檢測試劑盒應(yīng)用技術(shù)，靈敏度高，僅一個(gè)陽性細(xì)胞即可測到存在的顆粒酶-B。特異性強(qiáng)，結(jié)果重復(fù)性好。為抗病毒和抗腫瘤研究提供新型強(qiáng)有力的檢測工具。酶點(diǎn)技術(shù)與酶標(biāo)技術(shù)比較1、酶點(diǎn)技術(shù)明顯的特點(diǎn)是靈敏度增加2、酶點(diǎn)技術(shù)僅需要1個(gè)陽性細(xì)胞/孔即可,靈敏度達(dá)到1:1,000,000的陽性準(zhǔn)確分析3、酶標(biāo)技術(shù)需要至少要有400細(xì)胞/孔才可達(dá)到有意義的檢測水平4、能在單細(xì)胞水平上分析產(chǎn)

溫度梯度PCR和降落PCR區(qū)別大嗎2009/11/16: 溫度梯度PCR是指在退火溫度不太明確時(shí)，為了找到*退火溫度，在一臺PCR儀上同時(shí)做多管PCR，每一管放在儀器內(nèi)不同列（有的是不同行）上，分別進(jìn)行PCR（如50℃~60℃可以分6管，分別為50，52，54，56，58，60度），zui后看看哪個(gè)溫度的效果?？傊怯脕磉M(jìn)行退火溫度優(yōu)化的。降落PCR是在同一個(gè)PCR管內(nèi)進(jìn)行PCR，只是每個(gè)循環(huán)的溫度不同（如每個(gè)循環(huán)降1度）。一般兼并引物用這種方法多些。設(shè)計(jì)多循環(huán)反應(yīng)的程序，以使相連循環(huán)的退火溫度越來越低。由于開始時(shí)的退火溫度選擇為高于估計(jì)的Tm值，隨著

免疫球蛋白的定義及其臨床意義2009/11/12: 免疫球蛋白是指具有抗體活性的動(dòng)物蛋白,是由淋巴細(xì)胞（B細(xì)胞）產(chǎn)生的一種糖蛋白。主要存在于血漿（血清）中，也見于其他體液、組織和一些分泌液中。人血漿內(nèi)的免疫球蛋白大多數(shù)存在于丙種球蛋白（γ-球蛋白）中。免疫球蛋白臨床相關(guān)意義在于：IgG亞型異常是免疫反應(yīng)不正常的表現(xiàn)，各種疾病均會造成IgG亞型的減少或增多。某一種IgG亞型的缺乏zui常見的后果是體液免疫的不足，雖然這不一定會有臨床表現(xiàn)。由于一種IgG亞型水平降低可以伴有一種或幾種其他的IgG亞型水平的增高，從而使IgG總量水平仍然正常。因此，即使

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