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支原體早發(fā)現(xiàn)于1898年,1956年Robinson等從細胞培養(yǎng)物中分離出支原體,之后國內(nèi)外關(guān)于支原體污染細胞的報道屢見不鮮。它廣泛存在于自然界中,有80余種,污染細胞常見的支原體包括發(fā)酵支原體、豬鼻支原體、口腔支原體、精an酸支原體、梨支原體、唾液支原體和人型支原體。支原體通常附著在細胞的表面,并影響其宿主細胞的生理、遺傳等多方面的正常功能,用這些污染后貌似正常的細胞做試驗或生產(chǎn),將會嚴重影響結(jié)果。1、對細胞生長繁殖和形態(tài)的影響細胞培養(yǎng)物被支原體污染后生長減慢,且產(chǎn)生細胞病變,表現(xiàn)為細胞體
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微生物的染色方法很多,各種方法應用的染料也不盡相同,但是一般染色都要通過制片及一套染色操作程序。1、制片在干凈的載玻片上滴上一滴蒸餾水,用接種環(huán)進行無菌操作,挑取培養(yǎng)物少許,置載玻片的水滴中,與水混合做成懸液并涂成直徑約1厘米的薄層,為避免因菌數(shù)過多聚成集團,不利觀察個體形態(tài),可在載玻片之一側(cè)再加一滴水,從已涂布的菌液中再取一環(huán)于此水滴中進行稀釋,涂布成薄層,若材料為液體培養(yǎng)物或固體培養(yǎng)物中洗下制備的菌液,則直接涂布于載玻片上即可。2、自然干燥涂片在室溫下使其自然干燥,有時為了使之干得更快些,可
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檢測范圍:60pmol/L-2200pmol/L使用目的:本試劑盒用于測定斑馬魚血清、血漿及相關(guān)液體樣本中甲狀腺素(T4)含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中斑馬魚甲狀腺素(T4)水平。用純化的斑馬魚甲狀腺素(T4)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入甲狀腺素(T4),再與HRP標記的甲狀腺素(T4)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹-底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的
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勁馬生物|組織培養(yǎng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)
組織培養(yǎng)細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與體內(nèi)細胞基本相同,但在大體形態(tài)以及某些細微結(jié)構(gòu)方面仍存在著一定的差異。一、形態(tài)分類根據(jù)細胞是否貼附于支持物上生長,形態(tài)有所不同。呈懸浮生長時,不論細胞原來源于體內(nèi)何種類型細胞,由于生長在液體環(huán)境中,胞體基本呈圓形。大多數(shù)細胞是貼附型生長的。當細胞貼附在支持物上后,細胞分化現(xiàn)象常變得不顯著,易失去它們在體內(nèi)時的原有特征,在形態(tài)上表現(xiàn)單一化的現(xiàn)象。貼附于支持物表面后,開始仍為圓形,但為時很短,很快便經(jīng)過形態(tài)演變過渡成扁平形態(tài)。1.成纖維細胞型:此細胞形態(tài)與體內(nèi)成纖維細胞的相似而 -
勁馬生物|關(guān)于無外泌體血清的制備步驟以及相關(guān)注意事項
無外泌體血清是一種可由多種細胞分泌的直徑為30-150nm的膜性小囊泡。經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn),其內(nèi)含有獨-特的蛋白質(zhì)與核酸分子,所含成份與其細胞來源密切相關(guān),這也決定了無外泌體血清的功能特異性,如抗原提呈、信號傳導或誘導抗腫瘤免疫反應、細胞遷移、細胞分化、細胞間通信、腫瘤轉(zhuǎn)移等。目前,無外泌體血清研究已經(jīng)成為臨床診斷與基礎(chǔ)醫(yī)生的新熱點。以外泌體為代表的細胞外囊泡是近幾年研究的熱點,目前的外泌體研究主要通過研究體外培養(yǎng)細胞來源的外泌體,分析其在體內(nèi)外的功能作用。一般的血清FBS中含有供體細胞自然分泌的大量 -
人半乳糖缺乏抗體IgA1(Gd-IgA1)ELISA試劑盒使用說明書
人半乳糖缺乏抗體IgA1(Gd-IgA1)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:96T1pg/ml-50pg/ml使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中半乳糖缺乏抗體IgA1(Gd-IgA1)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗原夾心法測定標本中人半乳糖缺乏抗體IgA1(Gd-IgA1)水平。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,往包被的微孔中依次加入半乳糖缺乏抗體IgA1(Gd-IgA1),再與HRP標記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經(jīng)過che底洗滌 -
一免疫組化(LP法)操作步驟:1.切片常規(guī)脫蠟至水。如需抗原修復,可在此步后進行2.緩沖液洗3min/2次。3.為了降低內(nèi)源性過氧化物酶造成的非特異性背景染色,將切片放在HydrogenPeroxideBlock中孵育10-15分鐘。4.緩沖液洗5min/2次。5.滴加UltraVBlock,在室溫下孵育5分鐘以封閉非特異性的背景染色。(注:孵育不要超過10分鐘,否則會導致特異性染色降低。如果一抗的稀釋液中含有5-10%正常羊血清,這一步可以省略。)6.緩沖液洗5min/2次。7.滴加一抗工作液
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為了減少HBsAg檢測出現(xiàn)假陽性和假陰性,我們有必要對這種現(xiàn)象的原因進行分析,在實際的檢測工作中,造成HBsAg檢測出現(xiàn)假陽性和假陰性主要受以下因素影響,分述如下:1、ELISA法假陰性原因1.1標本用肝素或EDTA等抗凝處理易造成HBsAg檢測結(jié)果假陰性,肝素抗凝血漿會增加OD值,可能與高濃度肝素具有強大的負電荷,能吸附酶標記物不易洗脫有關(guān);EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中的辣根過氧化物酶活性,造成假陰性。1.2標本保存不當,在冰箱內(nèi)保存過久的標本,血清中IgG可聚合成多