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ELISA實(shí)驗(yàn)所有方法的缺點(diǎn)很明顯:1、重復(fù)性不好;2、收自身抗體、嗜異性抗體等干擾,易出現(xiàn)假陽(yáng)性;3、不論儀器和手工操作,干擾因素較多。影響最大的是溫度和時(shí)間。直接法(directELISA)將抗原直接固定在固相載體上,參加酶符號(hào)的一級(jí)抗體,即可測(cè)定抗原總量,此一級(jí)抗體的特異性非常重要。優(yōu)勢(shì):操作手續(xù)簡(jiǎn)略,因無(wú)須運(yùn)用二抗可防止交互反響。缺陷:實(shí)驗(yàn)中的一抗都得用酶符號(hào),但不是每種抗體都適合做符號(hào),費(fèi)用相對(duì)進(jìn)步。間接法(indirectELISA)此測(cè)定辦法與直接法相似,不一樣在于一級(jí)抗體沒有酶符
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人D二聚體(D2D)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:96T150pg/ml-4800pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中D二聚體(D2D)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人D二聚體(D2D)水平。用純化的人D二聚體(D2D)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入D二聚體(D2D),再與HRP標(biāo)記的D二聚體(D2D)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的
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牛腺病毒3型抗體(BAV-3 Ab)ELISA試劑盒使用說明書
牛腺病毒3型抗體(BAV-3Ab)ELISA試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。48T使用目的:本試劑盒用于測(cè)定牛血清、血漿及相關(guān)液體樣本中腺病毒3型抗體(BAV-3Ab)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗原夾心法測(cè)定標(biāo)本中牛腺病毒3型抗體(BAV-3Ab)表達(dá)。用純化的抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中腺病毒3型抗體(BAV-3Ab)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的抗原結(jié)合,形成抗原-抗體-酶標(biāo)抗原復(fù)合物,經(jīng)過che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化 -
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)技術(shù)中抗原抗體的反應(yīng)
一、抗體的結(jié)構(gòu)抗體是能與抗原特異性結(jié)合的免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。Ig分五類,即IgG、IgA、IgM、IgD和IgE。與免疫測(cè)定有關(guān)的Ig主要為IgG和IgM。Ig由兩個(gè)輕鏈(L)和兩個(gè)重鏈(H)的單體組成。Ig的輕鏈?zhǔn)窍嗤模笑?kappa)和λ(Lambda)兩種型別。五類Ig的重鏈結(jié)構(gòu)不同,這決定了它們的抗原性也不同。IgG和IgM的重鏈分別稱為γ(gamma)鏈和μ(mu)鏈。重鏈和輕鏈的N端的氨基酸排列順序因各種抗體而異,稱為可變區(qū),分別用VH和VL表示。兩 -
ELISA實(shí)驗(yàn)前必做的儀器和試劑準(zhǔn)備
ELISA技術(shù)自20世紀(jì)70年代初問世以來(lái),發(fā)展非常迅速,目前被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等許多領(lǐng)域。其基本原理是根據(jù)抗原或抗體能在一定條件下結(jié)合到固相載體的表面仍保持其免疫活性,抗原或抗體與酶結(jié)合形成的結(jié)合物仍能保持免疫學(xué)和酶的活性。結(jié)合物與相應(yīng)的抗原、抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入相應(yīng)的酶底物的顏色反應(yīng)來(lái)判斷有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng),而且顏色的深淺與相應(yīng)的抗原或抗體的量在一定的范圍內(nèi)成正比。由于抗原、抗體的反應(yīng)在1種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游 -
人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)elisa試劑盒使用說明書
人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)elisa試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)表達(dá)。用純化的人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過 -
關(guān)于白細(xì)胞介素的知識(shí)你了解多少
白細(xì)胞介素即是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。目前至少發(fā)現(xiàn)了38個(gè)白細(xì)胞介素,分別命名為IL-1~IL38,功能復(fù)雜,成網(wǎng)絡(luò),復(fù)雜重疊;在免疫細(xì)胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過程中均發(fā)揮重要作用,此外它們還參與機(jī)體的多種生理及病理反應(yīng)。免疫系統(tǒng)細(xì)胞的增殖、分化和功能受到一系列細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)。根據(jù)細(xì)胞因子的結(jié)構(gòu)同源性可將其分為幾個(gè)蛋白質(zhì)家族,如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、腫瘤壞死因子家族和造血因子家族等。白細(xì)胞介素穿插歸類為其中。白細(xì)胞介素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作 -
ELISA實(shí)驗(yàn)中樣本的收集和運(yùn)輸
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)可以用于:(1)檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等;(2)具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA的樣本收集與運(yùn)輸:利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。ELISA實(shí)驗(yàn)中的血清需采用血