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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細胞培養(yǎng)>>細胞株>> PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)
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品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-15 15:36:36瀏覽次數(shù):218次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化) | T25m2 | XG-X6322 |
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。 細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細胞處理:
1) 復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
冷凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgM)ELISA Kit Mouse Helicobacter pylori antibody(IgM)ELISA Kit
小鼠幽門螺旋桿菌抗體(IgG)ELISA Kit Mouse Helicobacter pylori antibody(IgG)ELISA Kit
小鼠印度刺猬因子(IHH)ELISA Kit Mouse Idian Hedgehog,IHH ELISA kit
小鼠吲哚銨2,3-雙加氧酶1(IDO1)ELISA Kit Mouse Indoleamine 2,3-dioxygenase 1,IDO1 ELISA kit
小鼠音猬因子N端(Shh-N)ELISA Kit Mouse sonic hedgehog N-Terminus,Shh-N ELISA Kit
小鼠乙型肝炎核心抗體(HBcAb)ELISA Kit Mouse hepatitis B virus core antibody,HBcAb ELISA Kit
小鼠乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA Kit Mouse hepatitis B virus surface antigen,HBsAg ELISA Kit
小鼠乙型肝炎表面抗體(HBsAb)ELISA Kit Mouse hepatitis B virus surface antibody,HBsAb ELISA Kit
小鼠乙型肝炎e抗原(HBeAg)ELISA Kit Mouse hepatitis B virus e antigen,HBeAg ELISA Kit
小鼠乙型肝炎e抗體(HBeAb)ELISA Kit Mouse hepatitis B virus e antibody,HBeAb ELISA Kit
小鼠乙酰(acetyl-CoA)ELISA Kit mouse acetyl-CoA ELISA Kit
小鼠胰脂肪酶(PL)ELISA Kit Mouse Pancreatic Lipase,PL ELISA Kit
小鼠(PK)ELISA Kit Mouse pancreatic kininogenase,PK ELISA Kit
小鼠胰高血糖素樣肽2(GLP-2)ELISA Kit Mouse glucagon-like peptide-2,GLP-2 ELISA Kit
小鼠胰高血糖素(GC)ELISA Kit Mouse Glucagon,GC ELISA Kit
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISA Kit Mouse Insulin-like growth factor binding protein 6,IGFBP-6 ELISA kit
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA Kit Mouse Insulin-like growth factor binding protein 4,IGFBP-4 ELISA kit
小鼠胰島素樣生長因子1受體(IGF-1R)ELISA Kit Mouse IGF-1R ELISA kit
小鼠胰島素降解酶(IDE)ELISA Kit Mouse Insulin-degrading Enzyme,IDE ELISA Kit
小鼠原激活肽(TAP)ELISA Kit Mouse trypsinogen activation peptide,TAP ELISA Kit
小鼠1(trypsin-1)ELISA Kit Mouse trypsin-1 ELISA Kit
小鼠(trypsin)ELISA Kit Mouse trypsin ELISA Kit
ALAS-E 英文名稱: 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
ASPP1 英文名稱: p53凋亡刺激蛋白1抗體
ASPP2 英文名稱: P53凋亡刺激蛋白2抗體
ARIP2B 英文名稱: 激活素受體2B抗體
AIMP2 英文名稱: AIMP2抗體
ACHE 英文名稱: 乙酰酶抗體
ALAS1 英文名稱: 5-氨基乙酰丙酸合酶1抗體
alpha Defensin 1 英文名稱: 防御素α1/3抗體
ABCG4 英文名稱: ABC膜轉(zhuǎn)運蛋白抗體
ATEXPA10 英文名稱: 植物延長蛋白(擬南芥)
A Raf 英文名稱: A-Raf抗體
Phospho-A Raf(Ser299) 英文名稱: 磷酸化A-Raf抗體
AMPD3 英文名稱: 紅細胞腺苷脫氨酶3抗體
ABP 英文名稱: 雄激素結(jié)合蛋白抗體
ALR 英文名稱: 肝再生增強因子抗體
Amyloid Precursor Protein 英文名稱: APP/ABPP淀粉樣肽前體蛋白抗體
AFP(A2) 英文名稱: 甲胎蛋白單克隆抗體(包被)
PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(低分化)AFP(A4) 英文名稱: 甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)
ARFIP1 英文名稱: ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體
AHR 英文名稱: 芳香烴受體抗體
ATRN 英文名稱: 吸引素抗體
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
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