操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨：客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無(wú)菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。

培養(yǎng)步驟：

對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide肉糜中狐貍源性成分（定性）anti- ACSL1 antibody人中期因子(MK)ELISA試劑盒

Zinc hydroxide肉糜中貓?jiān)葱猿煞郑ǘㄐ裕゛nti- ACSL3 antibody人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒

L-Serine;L-β-Hydroxyalanine;(S)-2-AMino-3-hydroxypropionic acid;(S)-(+)-Serine;L-3-Hydroxy-α-alanine;Ser;S食用油中鄰苯二酸二辛酯(DEHP)、鄰苯二酸二酯(DBP)anti- ACSL4/FACL4 antibody人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒

2-ChloroacetaMideClCH2CONH2;2-Chloroeth*食用油中B1anti- ACSL5 antibody人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒

3,4-Dichloroaniline食用油中基羥基茴香醚（BHA）、二基羥基苯（BHT）、叔基對(duì)苯二anti- ACSM2A antibody人P53(P53)ELISA試劑盒

Boron tribroMide食用油中苯并芘anti- ACSM3 antibody人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒

Thiophene食用油中酸價(jià)、過值anti- ACSM5 antibody人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒

1,3-Propanediol;TriMethylene glycol啤酒中酒精度、原麥芽汁濃度、總酸anti- ACSS1 antibody人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

PC-3人前列腺癌細(xì)胞Human IGFBP-6 (Insulin Like Growth Factor Binding Protein 6) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框117抗體anti- PCTP antibody前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human INSR (Insulin Receptor) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框118抗體anti- PCYOX1 antibody前動(dòng)力蛋白受體1(PKR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human APC (Activated Protein C) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框144抗體anti- PCYT1B antibody酮酸激酶(PK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human APLN (Apelin) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框151抗體anti- PCYT2 antibody酮酸激酶(PK)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human AP13 (Apelin 13) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框187抗體anti- PD-1/CD279 antibody基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human AP36 (Apelin 36) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框152抗體anti- PD-1/CD279 antibody基質(zhì)金屬蛋白酶3(MMP3)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human Apo A1-Ab (Anti-Apolipoprotein A1 Antibody) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框165抗體anti- PDAP1 antibody膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human LCN1 (Lipocalin 1) ELISA Kit20號(hào)染色體開放閱讀框166抗體anti- PDCD10 antibody膽囊收縮素A受體(CCKAR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)