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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞株>> GES-1人胃黏膜上皮永生細(xì)胞系
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所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-10-19 09:46:20瀏覽次數(shù):218次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
產(chǎn)品名稱 | GES-1人胃黏膜上皮永生細(xì)胞系 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號(hào) | XG-X6343 |
培養(yǎng)步驟:
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞|細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項(xiàng):
1. 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴(yán)格無菌操作,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點(diǎn):
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動(dòng)凍存管,使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍,使細(xì)胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi),將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細(xì)胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細(xì)胞懸液。
5)將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi),補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代,細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
Methyl benzoate;Oil of niobe;Benzoic acid Methyl ester醇中五氯苯溶液anti- ADIPOQ antibody人抗核周因子抗體(APF)ELISA試劑盒
Dibenzyl ether醇中環(huán)氧七氯B溶液anti- ADIPOQ antibody人抗肌動(dòng)蛋白抗體(AAA)ELISA試劑盒
2-Aminophenol正己烷中環(huán)氧七氯B溶液anti- ADIPOR2 antibody人抗肝素PF4復(fù)合物抗體/HIT抗體(HIT)ELISA試劑盒
Cyclohexanone;Ketohexahydrobenzene;PiMelic ketone;Hytrol O;Anone;Nadone正己烷中環(huán)氧七氯A溶液anti- ADK antibody人抗糖蛋白抗體(GP)ELISA試劑盒
Hydrofluoric acid醇中氟苯溶液anti- ADM2 antibody人抗單核細(xì)胞抗體(AMA)ELISA試劑盒
3,4-Dimethylaniline醇中對(duì)溴氟苯溶液anti- ADNP antibody人低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒
8-Hydroxyquinoline;Oxyquinoline;Oxine;Quinophenol;8-Quinolinone;Hydroxybenzopyridine;Oxybenzopyridine;Phenopyridine;Oxychinolin醇中正苯溶液anti- ADO antibody人沙眼衣原體(CT)ELISA試劑盒
Propyl Gallate; Gallic acid propyl ester; PG;醇中對(duì)硝基氯苯溶液anti- ADPGK antibody人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒
GES-1人胃黏膜上皮永生細(xì)胞系Human ABCA1(ATP Binding Cassette Transporter A1) ELISA Kit單核細(xì)胞趨化蛋白4抗體anti- PDS5A antibody胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human ABCG2 (ATP Binding Cassette Transporter G2) ELISA Kit CD34抗體anti- PDS5B antibody調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human ANP (Atrial Natriuretic Peptide) ELISA Kit 白細(xì)胞共同抗原抗體anti- PDSS2 antibody調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human bFGF-2 (Basic Fibroblast Growth Factor 2) ELISA Kit 分支酶GBE1抗體anti- PDXDC1 antibody調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human MGL (Monoacylglycerol Lipase) ELISA Kit補(bǔ)體成分5受體1抗體anti- PDXK antibody調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human AIRE (Autoimmune Regulator) ELISA Kit 4號(hào)染色體開放閱讀框46抗體anti- PDZD2 antibody調(diào)節(jié)激活正常T-細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human AXIN2 (Axis Inhibition Protein 2) ELISA Kit4號(hào)染色體開放閱讀框51抗體anti- PDZD3 antibody補(bǔ)體因子B(CFB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
Human AZU1 (Azurocidin 1) ELISA Kit C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員C抗體anti- PDZD3 antibody補(bǔ)體因子B(CFB)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
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