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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>細(xì)胞培養(yǎng)>>細(xì)胞株>> Vero非洲綠猴腎細(xì)胞
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品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-10-19 09:57:32瀏覽次數(shù):261次
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Vero非洲綠猴腎細(xì)胞 | T25m2 | XG-X6364 |
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研,不得用于臨床應(yīng)用。
冷凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1) 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號1199500bt,添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。也可根據(jù)實驗需要選擇懸浮培養(yǎng)基,使293T細(xì)胞懸浮生長。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二. 細(xì)胞處理:
1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作。
公司產(chǎn)品采用干冰運輸,經(jīng)過逐步的降溫,冷藏在-196℃度的液氮罐中,暫時停止其生命活動,保存其活性,使您的實驗更生動,公司代理品牌有:ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.
NA醇中喹螨醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- alpha Tubulin antibody人A(CsA)ELISA試劑盒
102White support acid wash醇中苯氧威溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha-1-Antitrypsin antibody人白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒
NA正己烷中唑螨酯溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha-1-Antitrypsin antibody人(Cyt-C)ELISA試劑盒
NA正己烷中虱螨脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha-2-antiplasmin antibody人脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒
13X molecular sieve醇中噻蟲胺溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha-2-macroglobulin antibody人脂蛋白α(Lp-α)ELISA試劑盒
NA醇中利谷隆溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha-2-macroglobulin antibody人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA試劑盒
NA醇中氧蟲酰肼溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha-sarcoglycan antibody人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISA試劑盒
N-BOC-piperidine-4-carboxylic acid醇中呋線威溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- alpha-SNAP antibody人脫氧吡啶酚/脫氧吡啶啉(DPD)ELISA試劑盒
Vero非洲綠猴腎細(xì)胞Human NEFL (Neurofilament, Light Polypeptide) ELISA Kit血栓素合成酶抗體anti- PIGS antibody白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human /nNOS (Nitric Oxide Synthase 1, Neuronal) ELISA Kit環(huán)酸鳥苷抗體anti- PIGT antibody白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human C-jun (V-Jun Sarcoma Virus 17 Oncogene Homolog) ELISA Kit多癌基因下調(diào)蛋白抗體anti- PIGZ antibody白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CC16 (Clara Cell 16kD protein) ELISA Kit 細(xì)胞色素P450 11B1抗體anti- PIH1D1 antibody白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CLDN1 (Claudin 1) ELISA Kit 內(nèi)皮因子12受體抗體anti- PIK3C2A antibody白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CLDN14 (Claudin 14) ELISA Kit酸化致癌基因C-Myc抗體anti- PIK3C2B antibody白介素12B(IL12B)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CD109 (Cluster of Differentiation 109) ELISA Kit 酶蛋白5B抗體anti- PIK3C2G antibody白介素12A(IL12A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CD30 (Cluster of Differentiation 30) ELISA Kit酶亞基3抗體anti- PIK3CG antibody白介素12A(IL12A)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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