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參 考 價 | 面議 |
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細胞株;(2)細胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項目的需要選擇不同類型的細胞培養(yǎng)瓶和相應的細胞密度。發(fā)貨的新鮮細胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右*培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項;3、公司售后服務標準。
保存和應用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細胞,如是新鮮細胞株,客戶收到細胞后應立即將其放入CO2細胞培養(yǎng)箱內靜置后2-3h,再進行后續(xù)的實驗操作。如是凍存細胞,客戶收到細胞后應立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進行復蘇。該細胞只可用于科研,不得用于臨床應用。
產品名稱 | LoVo人結腸癌細胞 |
規(guī)格 | T25m2 |
貨號 | XG-X6363 |
培養(yǎng)步驟:
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉移至離心管內。
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代,細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
1,3-Dimethylbarbituric acid正己烷中苯酰菌胺溶液標準樣品anti- Alpha E catenin antibody人高密度脂蛋白(HDL-C)ELISA試劑盒
1,3-Dichloro-2-propanol醇中精霜靈溶液標準樣品anti- Alpha galactosidase A antibody人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒
1,3-Dihydroxynaphthalene;Naphthoresorcinol;1,3-Na- phthalenediol醇中嘧菌環(huán)胺溶液標準樣品anti- Alpha galactosidase A antibody人αS轉移酶(α-GST)ELISA試劑盒
1,4-Dinitrobenzene醇中增效醚溶液標準樣品anti- Alpha galactosidase A antibody人同型半(Hcy)ELISA試劑盒
Cyclohexa-1,4-diene醇中氯吡脲溶液標準樣品anti- alpha N Catenin antibody人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
1,5-DibroMo pentane;PentaMethylene dibroMide;PentaMethylene broMide;1,5-DibroMopentane醇中啶酰菌胺溶液標準樣品anti- alpha Tubulin antibody人骨粘連蛋白(ON)ELISA試劑盒
1,5-Pentanediol正己烷中戊菌唑溶液標準樣品anti- alpha Tubulin antibody人(FA)ELISA試劑盒
1,6-DibroMohexane;HexaMethylene broMide;HexaMethylene dibroMide酮中噻蟲啉溶液標準樣品anti- alpha Tubulin antibody人內素(ET)ELISA試劑盒
LoVo人結腸癌細胞Human CS (Chondroitin Sulfate) ELISA Kit2號染色體開放閱讀框60抗體anti- PIG3 antibody血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CGβ (Chorionic Gonadotrophin Beta) ELISA Kit酸化周期素依賴性激酶7抗體anti- PIGA antibody血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CA12 (Carbonic Anhydrase XII) ELISA Kit酸化周期素依賴性激酶9抗體anti- PIGB antibody血小板生成素(TPO)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CBX3 (Chromobox Homolog 3) ELISA Kit 酸化細胞周期檢測點激酶1抗體anti- PIGF antibody型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit 酸化抑癌基因p16抗體anti- PIGK antibody型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA Kit酸化CREB-1抗體anti- PIGM antibody型纖溶酶原激活因子(uPA)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human CgA (Chromogranin A/Pancreastatin) ELISA Kit9號染色體開放閱讀框75抗體anti- PIGO antibody白介素10(IL10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
Human NEF3 (Neurofilament 3) ELISA Kit線粒體復合物NDUFS1蛋白抗體anti- PIGP antibody白介素10(IL10)檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)
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