公司產(chǎn)品采用干冰運(yùn)輸，經(jīng)過(guò)逐步的降溫，冷藏在-196℃度的液氮罐中，暫時(shí)停止其生命活動(dòng)，保存其活性，使您的實(shí)驗(yàn)更生動(dòng),公司代理品牌有：ATCC、sciencell、ICLC、GIBCO、IST-Banca等品牌.

      描述：(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株；(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶；(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

      發(fā)貨：客戶(hù)可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類(lèi)型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿(mǎn)50ml左右*培養(yǎng)基；2、說(shuō)明書(shū)及注意事項(xiàng)；3、公司售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

      保存和應(yīng)用：客戶(hù)可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮細(xì)胞株，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶(hù)收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研，不得用于臨床應(yīng)用。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備DMEM-H培養(yǎng)基(GIBCO,貨號(hào)1199500bt，添加NaHCO3 1.5g/L)，90%；胎牛血清，10%。也可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇懸浮培養(yǎng)基，使293T細(xì)胞懸浮生長(zhǎng)。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二． 細(xì)胞處理：
1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后加入少量，細(xì)胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
冷凍保存細(xì)胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時(shí)（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase儲(chǔ)存。*-20 ℃不可超過(guò)1 小時(shí)， 以防止冰晶過(guò)大，造成細(xì)胞大量死亡，亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。

1,2,4-Triazole酮中氟喹唑溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha actin antibody人血凝素(HA)ELISA試劑盒

1,2-Dichloropropane;Propylene chloride醇中乙氧氟草醚溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha actin antibody人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)ELISA試劑盒

syM-Dichloroethane;Ethylene dichloride;Glycol dicholride;Ethane dichloride醇中咯菌腈溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha Actin antibody人鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒

1,2-Diethylbenzene醇中抑菌靈溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- alpha Actinin antibody人鈣調(diào)酸酶(CaN)ELISA試劑盒

Propylene oxide醇中雙苯氟脲溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品（氟酰脲）anti- alpha Adaptin antibody人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒

NA醇中微囊藻素RR溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha adducin antibody人骨性酸酶(BALP)ELISA試劑盒

1,3-Butadiene;Bivinyl;Divinyl;Erythrene;Biethylene;α,γ-Butadiene;Vinylethylene;Pyrrolylene水中靛藍(lán)溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha B Crystallin antibody人環(huán)酰胺(CTX)ELISA試劑盒

1,3-Dimethyl-2-imidazolidinone醇中烯草酮溶液標(biāo)準(zhǔn)樣品anti- Alpha cardiac actin-specific antibody人β羥酸(β-OHB)ELISA試劑盒

ARPE-19人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞Human CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit 酸化原癌基因CBL2抗體anti- PIAS2 antibodyⅣ型膠原α1(COL4α1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CCKBR (Cholecystokinin B Receptor) ELISA Kit葉綠體蛋白酶抗體（植物）anti- PIAS3 antibody外皮蛋白(EVPL)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CCK-8 (Cholecystokinin 8) ELISA Kitβ鏈接素相互作用蛋白1抗體anti- PIAS4 antibody通用轉(zhuǎn)錄因子ⅡH肽1(GTF2H1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CETP (Cholesteryl Ester Transfer Protein) ELISA Kit酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體anti- PIAS4 antibody單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CENPF (Centromere Protein F) ELISA Kit 酸化粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子受體β抗體anti- PIBF1 antibody單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP4)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CHAc (Choline acetylase) ELISA Kit酸化N-鈣粘附分子抗體anti- PICK1 antibody型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human PC/CPG (Choline Phosphoglyceride) ELISA Kit酸化后期促進(jìn)復(fù)合蛋白3抗體anti- Piezo1 antibody型纖溶酶原激活因子受體(uPAR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

Human CHRM2 (Cholinergic Receptor, Muscarinic 2) ELISA Kit 2號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框24抗體anti- PIF1 antibody血小板生成素(TPO)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)

收到細(xì)胞如何處理？

1、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請(qǐng)拍照，（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%，可正常傳代；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。