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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T貓嗜衣原體PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-13 13:53:42瀏覽次數(shù):175次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Chlamydophila felisPCR |
貨號 | XG-P1235 |
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標準品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
中國藍瓊脂250g弱選擇性培養(yǎng)基,用于腸道致病菌的選擇性分離
Caseinpeptone-lecithin-polysorbate broth (base) 1.11723.0500 MERCK默克 incubation media Caseinpeptone-lecithin-polysorbate broth (base) 1.11723.0500 MERCK默克
酪蛋白瓊脂 100g 用于鑒別蠟樣芽孢桿菌分解酪蛋白試驗 (GB/T4789.28-2003中4.65,GB/T4789.14-2003)。
Wistar大鼠骨髓間質(zhì)干細胞成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基Wistarratbonemarrowmesenchymalstemcellsandosteogenicdifferentiationmedium
MotilityTestMedium(Semisolid)依來鉻TEriochrome Black TInd25g
LM0008φ30混合纖維素酯微孔濾膜0.22um99
E0720-100GEDTA 2K 以兒按四乙酸二鉀25102-12-9100g
溴甲酚綠5g
Thiourea100gBTLA Others Mouse 小鼠 BTLA 人細胞裂解液 (陽性對照)
Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293 001B
人臍帶間質(zhì)干細胞 Human umbilical cord mesenchymal stem cells
3T3D細胞,人骨髓瘤細胞 嗜熱脂肪地芽孢桿菌 SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細胞;293T
TE671 subline No.2(人橫紋肌肉瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Hs 578T(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 正常細胞 Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181A
貓嗜衣原體PCR檢測試劑盒stuart運送培養(yǎng)基(含活性炭)250g用于淋球菌的標本采取和輸送
Peptone water( buffered) 緩沖蛋白胨水 1.07228.0500 MERCK默克 incubation media Peptone water( buffered) 緩沖蛋白胨水 1.07228.0500 MERCK默克
改良CCD瓊脂配套試劑 10支/盒 每支添加于100ml(022212)中配成MLST
MouseiPSPlat-E細胞培養(yǎng)基MouseiPSPlat-Ecellculturemedium
含鐵牛奶培養(yǎng)基 250g 用于產(chǎn)氣莢膜梭菌“暴烈發(fā)酵”試驗5ml一次性注射器(100支/盒) 進口分裝 四乙酸二鉀
1.75ml比色皿 進口分裝 GuanidineThiocyanate
5×A-plusMasterMix 進口分裝 L-Isoleucine
D2000DNAladder(100-2000bp) 進口分裝 4-傘花基-β-D-半乳糖苷IFNB1 Others Human 人 Ierferon beta / IFN-beta / IFNB CHO細胞裂解液 (陽性對照)
CL-0154MDCK(犬腎細胞)5×106cells/瓶×2
人肝竇內(nèi)皮細胞裂解物HHSECL
小香豬皮膚細胞;SSC-S2 組織細胞淋巴瘤細胞,U-937細胞 NUTU-19細胞,大鼠卵巢癌細胞株
SV40轉(zhuǎn)染人成骨細胞;hFOB 1.19
HA Others H1N3 甲型流感 H1N3 (A/duck/NZL/160/1976) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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