使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

產(chǎn)品名稱：豬瘟病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱：Classical Swine Fever Virus(CSFV)RTPCR
編號：XG-P1248
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光，快遞免費送貨上門。

注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

支原體檢測培養(yǎng)基

真菌瓊脂培養(yǎng)基 250(g) incubation media 真菌瓊脂培養(yǎng)基 250(g)

4-甲基傘形酮葡糖苷酸(MUG)培養(yǎng)基 100g 用于大腸埃希氏桿菌快速檢測。(《中華人民共和國藥典》2010年版)

酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基(YPD)YeastPeptoneDextroseAgar用于測定酵母菌總數(shù)

氯胰蛋白胨稀釋液 250g 用于檢測亞鹽還原梭菌的樣品制備GDX　102(聚二本多孔小球)GDX 102,Polydivinylbenzene porous beads80-100目25g

ZS06060ml一次性射器166

PJ597-5GPOPSO 派嗪-N, N-雙(2-羥基乙烷磺酸)108321-07-95g

Cacodylic Acid, wo7ium Salt, Trihydrate100g

100mgNFASC Others Human 人 NFASC / Neurofascin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

tTA基因修飾的小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02-CAG-tTA-3E6

CM-M115小鼠小梁網(wǎng)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

M2e細(xì)胞，人喉癌細(xì)胞 人腸系膜下腔動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞,Ealy926細(xì)胞 中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-E1

C6(大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

CEACAM1 Others Human 人 CEACAM1 / CD66a 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
豬瘟病毒PCR檢測試劑盒SporulationBroth

Elek氏培養(yǎng)基 用于致瀉大腸埃希氏菌的產(chǎn)毒培養(yǎng)

TCH(噻吩-2-羧酸酰肼) 0.1 加入改良羅氏培養(yǎng)基中制成TCH培養(yǎng)基，用于分枝桿菌鑒定

Wort瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶麥芽汁瓊脂基礎(chǔ)，用于真菌，特別是酵母菌的計數(shù)，每培養(yǎng)基中添加0.235g2incubationmediaWort瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶麥芽汁瓊脂基礎(chǔ)，用于真菌，特別是酵母菌的計數(shù)，每培養(yǎng)基中添加0.235g21702

標(biāo)準(zhǔn)I號營養(yǎng)瓊脂 250g 標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌計數(shù)、含糖(MERCK方法)Taq Plus DNA聚合酶  進口分裝  大鼠白三烯B4(rat LTB4)

6 x 上樣緩沖液, 15% ficoll  進口分裝  大鼠甲狀旁腺激素(rat I-PTH)

吐溫80(化學(xué)純)  進口分裝  大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白 -1(rat MCP-1/CCL2)

20 x PBS (磷酸緩沖鹽水)  進口分裝  兔抗酸性磷酸酶5b(rabbit TRACP-5b)CNDP1 Others Mouse 小鼠 CNDP1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

CL-0329Chang liver (CCL13) (人張氏肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠肺動脈成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

Psi2 DAP小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 Psi2 DAP mouse embryo fibroblasts DMEM培養(yǎng)基+10%FBS

IL1B Protein Mouse 重組小鼠 IL-1 beta / IL1B 蛋白

NCI-H596(人肺腺鱗癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 A10(大鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞)

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。