產(chǎn)品名稱：登革病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Dengue Virus(DENV)2RTPCR
編號(hào)：XG-P1318
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng)，無(wú)非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

胰蛋白胨大豆瓊脂250g一種通用培養(yǎng)基，用于各種微生物的培養(yǎng)(AOAC

DMEM(高糖)，干粉 "含4500mg/l葡萄糖，L- incubation media DMEM(高糖)，干粉 "含4500mg/l葡萄糖，L-

金耳、黃木耳 支/瓶

RODAC培養(yǎng)皿(TSA)(6.5cm)用于環(huán)境、器皿、設(shè)備和表面的無(wú)菌檢測(cè)

BufferedSodiumChloride–PeptoneSolution乳酸乙酯etxyl LactateGCS2ml

SM0241GeneRuler 100bp DNA Ladders199

A0486-100GAmmonium Persulfate [APS] 過(guò)流銨7727-54-0100g

Coomassie® Brilliant Blue R-250100g

Yeast nitnogen Base without Amino500gANGPTL5 Others Human 人 ANGPTL5 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

CL-0273ECV-304(人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

人心肌細(xì)胞-心房cDNAHCF-aa cDNA

HEL細(xì)胞，紅白血病細(xì)胞 人肺腺癌細(xì)胞系,PG49細(xì)胞 表皮角化細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

狗腎細(xì)胞隆突型;MDCK superdome

RK3 Others Human 人 kC / RK3 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
登革病毒2型PCR檢測(cè)試劑盒RoseBengalMedium

腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊鈉瓊脂) 250(g) incubation media 腸球菌瓊脂(膽汁七葉苷疊鈉瓊脂) 250(g)

發(fā)酵培養(yǎng)基 Mannitol Ferment Medium 250克 腸道桿菌的鑒別，細(xì)菌發(fā)酵試驗(yàn)

酪蛋白瓊脂250用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia酪蛋白瓊脂250用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))

T1N0肉湯 250g 用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))TrypticaseSoy-YeastExtractAgar  進(jìn)口分裝  Nω-(4-甲氧基-2,3,6-三磺?；?-L-精酸  H-Arg(Mtr)-OH.1/2H2O   ：  80745-10-4  質(zhì)量規(guī)格：  >98%,BR

Mn2+NutrientAgar  進(jìn)口分裝  L-茶酸  L-Theanine  ：  3081-61-6  質(zhì)量規(guī)格：  ≥98%,BR

MMO-MUGMedium  進(jìn)口分裝  L-谷酸-5-叔丁酯-1-甲酯鹽酸鹽  L-Glutamic acid 5-tert-butyl 1-methyl ester hydrochloride   ：  1582963  質(zhì)量規(guī)格：  >95%,BR

BufferedPower-nitratemedium  進(jìn)口分裝  L-精酸甲酯二鹽酸  H-Arg-OMe•2HCl  ：  26340-89-6  質(zhì)量規(guī)格：  >99%,BRPRAP1 Others Human 人 PRAP1 / Proline-rich acidic 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)

滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基SM

人淋巴細(xì)胞;1301

大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1 神經(jīng)上皮瘤細(xì)胞，SK-N-MC細(xì)胞 MPC細(xì)胞，小鼠垂體細(xì)胞

HT-29, 人結(jié)腸癌細(xì)胞 Human

CD200R1 Others Mouse 小鼠 CD200R1 / OX-2R 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照) 

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。