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紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒

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產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海市

更新時間:2020-11-02 14:19:29瀏覽次數(shù):193次

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紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1.  即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。

產(chǎn)品名稱

 紅斑丹毒絲菌PCR檢測試劑盒

英文名稱

 Erysipelothrix rhusiopathiaePCR

貨號

 XG-P1414

 

使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1  確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2  將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3  12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
       若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
   注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
       此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6  12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
   注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DN段的充分溶解。
7  將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
   注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
       對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)

細(xì)菌L型增菌液65g用于L型細(xì)菌增菌培養(yǎng)

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UVMMediumBromobenzene  溴苯  108-86-1

Hydrazinium hydroxide  水合聯(lián)(50%,80%)  10217-52-4

Span 80  司班80  1338-43-8

1-Propanol  正丙醇  71-23-8CD164 Others Rat 大鼠 CD164 / Endolyn 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

人侵襲性脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞;MuM-2B

胎兒骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Fetal bone marrow mesenchymal stem cells

SHG-44細(xì)胞,神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 霉 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞RNAHLEC miRNA5 μg

SC-1(小鼠胚胎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

HCC1937(人癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0377LLC-WRC 256(大鼠腹水癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2 恒河猴腎細(xì)胞;LLC-MK2
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大鼠成纖維細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒  進(jìn)口分裝  小鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒

大鼠成年表皮角質(zhì)形成層細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒  進(jìn)口分裝  小鼠干細(xì)胞因子/肥大細(xì)胞生長因子(SCF/MGF)ELISA試劑盒PTPN11 Others Mouse 小鼠 SHP2 / PTPN11 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)

雜交瘤(B類);Z51B3C10H12A12G2F7E7

人淋巴成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

PA317細(xì)胞,逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝用的人胚胎成纖維細(xì)胞 小腸結(jié)腸炎耶爾森氏菌 豚鼠肺細(xì)胞;GP-F1

CCL17 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CCL17 / TARC 蛋白 (His 標(biāo)簽)

NG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人 FAM20B / Gxk1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 

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