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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T嗜冷黃桿菌PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-03 10:49:15瀏覽次數(shù):125次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
產(chǎn)品名稱:嗜冷黃桿菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Flavobacterium psychrophilumPCR
編號:XG-P1438
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
彎曲桿菌檢驗培養(yǎng)基
雙水解酶(綠膿桿菌) 20支 綠膿桿菌用
乳酸桿菌選擇性瓊脂 Lactobacillus Selective Agar 250 用于乳酸菌檢測和分離培養(yǎng)(ACUMEDIA)
PALCAM瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加incubationmediaPALCAM瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶用于李斯特氏菌選擇性分離,每培養(yǎng)基中添加1403
StuartTransportMediumTin fluoroborate 硼酸亞錫 13814-97-6
Di-n-octyltin oxide 氧化二辛基錫 870-08-6
Tributyltin 三正丁基氫化錫 688-73-3
HEXABUTYLDITIN 六正丁基二錫 813-19-4CD14 Others Human 人 CD14 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
CL-0135L1210(小鼠白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
小鼠小腸血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
Pig MSC豬骨髓間質(zhì)干細(xì)胞 Pig MSC of porcine bone marrow mesenchymal stem cells DMEM低糖+10% FBS+glutamin
IL6 Protein Rat 重組大鼠 IL6 / Ierleukin-6 蛋白
RM1(大鼠肌肉成纖維樣細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 PC-12未分化(大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤)
嗜冷黃桿菌PCR檢測試劑盒NAC瓊脂培養(yǎng)基250g用于綠膿假單胞菌的分離培養(yǎng)
EEM培養(yǎng)基 EEM medium 用于致病性大腸桿菌的增菌培養(yǎng)和腸桿菌的增菌培養(yǎng)
堿性膽鹽瓊脂 Alkaline Bile Salt Agar 250 用于分離霍亂弧菌
沙氏液體培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌增菌培養(yǎng)incubationmedia沙氏液體培養(yǎng)基250g/瓶用于真菌增菌培養(yǎng)
PBS-Tween20lotion氯前列醇鈉(D型) 進(jìn)口分裝 小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CNTF)
(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口分裝 小鼠血管內(nèi)皮抑素(mouse Endostatin)
進(jìn)口分裝 小鼠類胰島素生長因子-2(mouse IGF-2)
+碳酸鈉 進(jìn)口分裝 小鼠IP-10(mouse IP-10)NOV Others Canine 狗 CCN3 / NOV 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
兔腎細(xì)胞;RK13
CL-0133KLE(人宮內(nèi)膜癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
P3/NS1/1-Ag4-1細(xì)胞,鼠骨髓瘤細(xì)胞 人B淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞,RAMOS(RA.1)細(xì)胞 小鼠子細(xì)胞;U14
ARPE-19(人視網(wǎng)膜上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
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