使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭，從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭，從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR（見下步），每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏，還具有以下特點：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

梭菌屬測定用培養(yǎng)基250g用于梭菌屬細菌檢測

甲苯胺藍-DNA酶瓊脂 Toluidine Blue DNAse Agar 用于核糖核酸酶檢測

C.L.E.D 培養(yǎng)基 C.L.E.D Medium 250 用于尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)(OXOID方法)

梭菌增菌培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)incubationmedia梭菌增菌培養(yǎng)基250g/瓶用于梭菌的增菌培養(yǎng)

SimmonsCitrateAgar3-Chloropropyne  3-  624-65-7

D-(+)-Cellobiose  D-纖維二糖  528-50-7

Cyclopropyl acetylene  環(huán)丙乙炔  6746-94-7

STACHYOSE TETRAHYDRATE  水蘇四糖  10094-58-3PROK1 Others Human 人 EG-VEGF / prokineticin-1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)

EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;Mao

CL-0404NCI-H596(人肺腺鱗癌細胞)5×106cells/瓶×2

NRK-52E，大鼠腎細胞 Sars蛋白表達株，293sars181A細胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌細胞)

人前列腺癌低轉(zhuǎn)移細胞株;PC-3M-2B4

BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照)
PCR檢測試劑盒MUGMedium

厭氧瓊脂 250(g) incubation media 厭氧瓊脂 250(g)

胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ) Trypticase Soy Sheep Blood Agar Base 250克 蠟樣芽孢桿菌的溶血測試驗

培養(yǎng)基250用于彎曲桿菌耐受性試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia培養(yǎng)基250用于彎曲桿菌耐受性試驗(GB標(biāo)準(zhǔn))

42℃growthMedium維因(標(biāo)準(zhǔn)品)  進口分裝  WI38/VA13(SV-40Z轉(zhuǎn)化肺成纖維細胞)

N,N-二苯胺(standard for GC,≥99.5%(GC))  進口分裝  人肺腺癌細胞（胸膜滲出液）

鍶標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml)  進口分裝  人非小細胞肺癌細胞

水硬度標(biāo)準(zhǔn)溶液(45.0mmol/l(以CaCO3計)，基體:0.1mol/L HCl)  進口分裝  人髓性紅白血病細胞CD4 Others Human 人 CD4 / LEU3 (aa 1-208) 人細胞裂解液 (陽性對照)

人少突膠質(zhì)前體細胞-懸浮生長裂解物HOPC-os L

CAM191 EBV-轉(zhuǎn)化人淋巴細胞

CL-0094HCC827(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2

正常細胞

人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5 人臍靜脈內(nèi)皮細胞*培養(yǎng)基 100mL

產(chǎn)品特點：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時進行多個檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。