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參 考 價 | 面議 |
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產物長度為 494 bp。
3. 本產品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產品名稱 | |
英文名稱 | Hepatopancreatic Parvovirus(HPV)PCR |
貨號 | XG-P1543 |
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存
2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業(yè)進行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液22200250g用于水中多管發(fā)酵法或濾膜法測定大腸菌GB/T5750.06和GB/T8538-2008)。
瓊脂 (3號瓊脂)(CM0049) Oxoid incubation media 瓊脂 (3號瓊脂)(CM0049) Oxoid
耐硼賴氨酸芽孢桿菌 支/瓶
改良麥康凱(CT-SMAC)瓊脂250g用于大腸桿菌O離培養(yǎng)(GB)標準
美國藥典培養(yǎng)基(USP標準)Cinchonidine 辛可尼丁 485-71-2
3-BENZYL-5-(2-HYDROXYETHYL)-4-METHYLTHIAZOLIUM CHLORIDE 3-芐基甲基噻唑化鋰 4568-71-2
Borneol 2-茨醇 507-70-0
3-Pyridylboronic acid -3-硼酸 1692-25-7SLAMF1 Others Rat 大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 人細胞裂解液 (陽性對照)
人主動脈平滑肌細胞HASMC
SV40轉化的非洲綠猴腎細胞;COS-1
NCI-H2227細胞,人肺小細胞肺癌 大鼠肝細胞,BRL大鼠Buffalo細胞 CM-R063大鼠腎小球內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
RD(人惡性胚胎橫紋肌瘤細胞) 5×106cells/瓶×2
Promocell C-28056 M2-Macrophage GenerationMedium DXF, M2-巨噬細胞生成培養(yǎng)基DXF 250ml
肝胰腺細小病毒PCR檢測試劑盒Mar
堿性蛋白胨水 Alkaline Peptone Water 用于霍亂弧菌選擇性增菌培養(yǎng)(SN標準)
小牛血清 Calf serum 200毫升 診斷試劑用
Schaedler肉湯250g/瓶用于厭氧菌的增菌incubationmediaSchaedler肉湯250g/瓶用于厭氧菌的增菌
pH7.3PBS緩沖液 250g PBS是Tris-HCl緩沖鹽溶液m-遠藤氏培養(yǎng)基 進口分裝 1-十六烯(>99.5%(GC),標準物質) 1-Hexadecene : 629-73-2 質量規(guī)格: >99.5%(GC),標準物質
Andrade氏糖類肉湯 進口分裝 DBD-ED [=4-(N,N-二甲基磺酰)-7-(2-基乙基基)-2,1,3-苯并惡二唑] DBD-ED [=4-(N,N-Dimethylaminosulfonyl)-7-(2-aminoethylamino)-2,1,3-benzoxadiazole] : 189373-41-9 質量規(guī)格: 用于高效液相色譜標記
結晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)5kg用于大腸菌群的固體平板檢測(GB、SN標準) 進口分裝 乙酸異戊酯(>98.0%(GC)) Isoamyl Acetate : 123-92-2 質量規(guī)格: >98.0%(GC)
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基(DFI瓊脂)1000ml用于阪崎桿菌的顯色培養(yǎng),阪崎桿菌顯藍色,其它腸桿菌顯無色。 進口分裝 庚烷(>99.0%(GC)] Heptane : 142-82-5 質量規(guī)格: >99.0%(GC)HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Cambodia/S1211394/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照)
CM-H020人胰島β細胞*培養(yǎng)基100mL
(含10mL 酶解緩沖液) 1mL
U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7](慢病毒構建穩(wěn)定株)人腦神經膠質瘤細胞 U-373MG-EGFP-puro[U-373MG-pLVT7] (leiviral consuct stable sain) of human brain glioma cells 1640+10%Hyclone 滅活血清+2μg/ml puromycin
IL21 Protein Rat 重組大鼠 IL21 / Ierleukin 21 蛋白 (His 標簽)
人表皮角質細胞-新生兒(HEK-n)( 5×105 ) 細胞名稱 種屬
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
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