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當前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T熱帶利什曼原蟲PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-04 12:36:34瀏覽次數(shù):129次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標準曲線
本試劑盒不但準確、快速、靈敏,還具有以下特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Leishmania tropicaPCR |
貨號 | XG-P1680 |
注意事項:
①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
霉菌培養(yǎng)基250g用于藥品,生物制品霉菌無菌試驗(GB標準)
多價蛋白胨酵母膏(PY)培養(yǎng)基 250(g) incubation media 多價蛋白胨酵母膏(PY)培養(yǎng)基 250(g)
脫羧酶對照試驗培養(yǎng)基 Decarboxylase Cool Medium 5克 脫羧酶試驗陰性對照(無氨基酸)
CandidaElective瓊脂250用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測定(Merck方法)incubationmediaCandidaElective瓊脂250用于食品中Candida及酵母菌總數(shù)測定(Merck方法)
BrilliantGreenEnrichmentBrothBase1,4-Diazacyclohexane 無水
1-Hydroxy-2-naphthoic acid 1-羥基-2- 86-48-6
5-Sulfosalicylic acid dihydrate 5-磺基水楊酸 5965-83-3
1-Benzyl 1-芐基SGK3 Others Human 人 SGK3 / SGKL 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
小腸血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
正常大鼠腎細胞;NRK
22RV1細胞,前列腺癌細胞 人肝癌細胞,Bel-7405細胞 CL-0024Anglne(人卵巢癌細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞K1(亞系克隆);CHO-K1
IL1RAPL1 Others Human 人 IL1R8 人細胞裂解液 (陽性對照)
熱帶利什曼原蟲PCR檢測試劑盒HelicobacterPyloriMedium
保存15-30°" 15710-064 10ml 保存15-30°" 15710-064 10ml
褐球固氮菌 的含量測定,檢測莫能菌素,品質控制,測試殺菌劑 支/瓶
NutrientAgar
馬鈴薯葡萄糖瓊脂(PDA) 250g 用于霉菌,酵母菌計數(shù)HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 進口分裝 兔子甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒
MA-782(小鼠癌細胞) 進口分裝 兔子白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
MG-63(人骨肉瘤細胞) 進口分裝 兔子β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)ELISA試劑盒
QGY-7701(人肝癌細胞) 進口分裝 兔血栓素B2(TXB2)ELISA試劑盒CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 人細胞裂解液 (陽性對照)
小鼠黑色素瘤細胞;B16-F1
LOVO 人結腸癌細胞
MCF7 [MCF-7]人癌細胞 MCF7 human breast cancer cell line [MCF-7] 1640+10% FBS
SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 標簽)
人皮膚成纖維細胞;CCC-HSF-1 B16-F10, 小鼠黑色素瘤高轉移細胞 Mouse
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應,無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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