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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T錦鯉皰疹病毒PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-04 12:42:27瀏覽次數(shù):119次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Koi Herpesvirus(KHV)PCR |
貨號(hào) | XG-P1663 |
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號(hào) | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
鈉培養(yǎng)基培養(yǎng)基,用于細(xì)菌鹽利用試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
GAMBroth,Modified
葡萄糖半固體培養(yǎng)基 Dextrose Semisolid Medium 250 用于志賀氏菌的復(fù)合生化試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn))
Nielsen培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)incubationmediaNielsen培養(yǎng)基250g/瓶用于植物組織培養(yǎng)
新生霉素 1ml/支*5 每支添加于225ml HBJ8663中SODIUM NITROPRUSSIDE DIHYDRATE 亞硝基鐵鈉 13755-38-9
Iron 鐵粉/還原鐵粉/納米鐵粉 7439-89-6
Octanoic acid 正辛酸 124-07-2
Hexanoic acid 正己酸 142-62-1OPTN Others Human 人 Optineurin / OPTN 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
敘利亞倉鼠皮膚細(xì)胞;GH-S1
卵巢微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞 人胚肺細(xì)胞,NCI-H1563[H1563]細(xì)胞 MLTC-1(間質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞)
白介素-2轉(zhuǎn)染耐VP16絨癌細(xì)胞;JEG-3/VP16-IL-2
CD27 Others Mouse 小鼠 CD27 / TNFRSF7 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
錦鯉皰疹病毒PCR檢測試劑盒Iodinesolution
固氮根瘤菌培養(yǎng)基 250g 用于固氮菌的分離培養(yǎng)
腸道菌計(jì)數(shù)瓊脂 (VRBDA) Violet Red Bile Dextrose Agar 250 用于腸道菌計(jì)數(shù)和腸桿菌科鑒別(MERCK方法)
胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于細(xì)菌培養(yǎng)及抑菌劑效力檢查incubationmedia胰酪胨大豆瓊脂培養(yǎng)基250g/瓶用于細(xì)菌培養(yǎng)及抑菌劑效力檢查
MFC瓊脂平板(9cm) 10個(gè)/包 用于大腸菌群的濾膜法檢測1MDTT 進(jìn)口分裝 硝基四唑紫
25mm微孔濾膜(國產(chǎn),0.22μm/0.45μm) 進(jìn)口分裝 L-Cysteine
5×TBE 進(jìn)口分裝 化鋰
50ml擱架式離心管架 進(jìn)口分裝 L-賴酸鹽酸鹽ENPP5 Others Human 人 ENPP5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
腎動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
大鼠膀胱成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BRL 3A大鼠肝細(xì)胞 Rat hepatic cells BRL 3A DMEM培養(yǎng)基+10%FBS
IGFBP6 Protein Mouse 重組小鼠 IGFBP6 / IBP-6 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HCC38(人導(dǎo)管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基PAM
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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