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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50T七星庫(kù)道蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-04 12:45:07瀏覽次數(shù):142次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線產(chǎn)品及特點(diǎn):
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過(guò)程簡(jiǎn)單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速,整個(gè)過(guò)程只需要15分鐘左右,不需要液氮對(duì)植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式,在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化,適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
產(chǎn)品名稱:七星庫(kù)道蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Kudoa septempunctataPCR
編號(hào):XG-P1664
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時(shí)DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無(wú)水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì),以獲得高質(zhì)量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預(yù)熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無(wú)菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對(duì)目的段濃度要求而定。
對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱,會(huì)提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照(以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20 μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測(cè)樣品需要做三次重復(fù),下表只列出一次。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照,并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后*后加)
木糖-明膠培養(yǎng)基250g用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗(yàn)
乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 Lactose Peptone Broth 用于飲用水,水源水中總大腸菌群的測(cè)定(GB標(biāo)準(zhǔn))
AC肉湯 AC Broth 250 用于常見(jiàn)微生物增菌培養(yǎng)和不含防腐劑樣品的無(wú)菌試驗(yàn)(Alpha Biosciences方法)
疊鈉血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶添加5%脫纖維羊血,用于鏈球菌和葡萄球菌分離和溶血試驗(yàn)incubationmedia疊鈉血瓊脂基礎(chǔ)250g/瓶添加5%脫纖維羊血,用于鏈球菌和葡萄球菌分離和溶血試驗(yàn)
4-甲基傘形酮-D-葡萄糖醛酸苷(MUG) 0.1g 0.01g添加于100mlHB0146(LST-MUG)中,用于O157鑒定Ferric nitrate nonahydrate 鐵 7782-61-8
Myristic acid 十四酸 544-63-8
Stearic acid 硬脂酸 21128
4-Hydroxy-3-methoxycinnamic acid 阿魏酸 1135-24-6NRG1 Others Canine 狗 NRG1-alpha (EGF Domain) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠網(wǎng)織細(xì)胞肉瘤;M5076
MCF-7 [MCF7], 人癌細(xì)胞系
96-C細(xì)胞,低轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,PC-3細(xì)胞 人膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞總RNAHBdSF NA
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-p7;Vero-HCV-p7
AHSG Others Mouse 小鼠 Fetuin-A / AHSG 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
七星庫(kù)道蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒IntergratedPotatoMedium
葡萄糖半固體培養(yǎng)基 250(g) incubation media 葡萄糖半固體培養(yǎng)基 250(g)
木糖發(fā)酵管 木糖發(fā)酵管 20支 BR
UBA培養(yǎng)基250用于啤酒中厭氧菌檢測(cè)incubationmediaUBA培養(yǎng)基250用于啤酒中厭氧菌檢測(cè)
CCDA基礎(chǔ) 250g 用于彎曲桿菌分離培養(yǎng)(WHO方法)Bromophenolblue溴酚藍(lán) 進(jìn)口分裝 次甲基藍(lán) (亞甲基藍(lán))
D2000plusIIDNAladder 進(jìn)口分裝 MUP,Disodium,Trihydrate
DNAMarkerI(100-600bp) 進(jìn)口分裝 N-Acetyl-DL-alanine
FastGreenFCF固綠 進(jìn)口分裝 化鎳CD80 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD80 / B7-1 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
人骨肉瘤細(xì)胞;U-2 OS [U2OS;U2-OS;U-2OS]
CM-H106人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
MGC803-GFP細(xì)胞,綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞,Saos-2細(xì)胞 293來(lái)源病毒包裝細(xì)胞;ΦA-GP
Eca-109(人食管癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
C2 Others Human 人 C2 / Compleme Compone 2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
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