產(chǎn)品及特點(diǎn)：
本產(chǎn)品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑，得到的產(chǎn)物可以直接用于PCR。整個(gè)過(guò)程簡(jiǎn)單快速，尤其適合于大規(guī)模的轉(zhuǎn)基因植物篩選時(shí)樣品的制備。
1. 快速，整個(gè)過(guò)程只需要15分鐘左右，不需要液氮對(duì)植物組織進(jìn)行冰凍、機(jī)械處理、純化或者DNA的沉淀。運(yùn)輸及保存2. 一管式，在一個(gè)試管內(nèi)完成所有操作，不容易交叉污染。常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR，剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動(dòng)化，適合于海關(guān)和企業(yè)進(jìn)行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。

產(chǎn)品名稱(chēng)：巨球菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱(chēng)：Macrococcus spp.PCR
編號(hào)：XG-P1699
分類(lèi)：PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門(mén)。

使用及效果：將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1  確定PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液的體積。將PCR反應(yīng)液或其他酶促反應(yīng)液轉(zhuǎn)移至一個(gè)新的1.5 ml離心管中，向其中加入等體積溶液BD?；旌暇鶆?。
2  將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中，靜置2min。
3  12,000 rpm離心1min，棄濾液。
   注：此時(shí)DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
       若溶液體積大于純化柱容積（800 μl），可分兩次離心。
4  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min，棄濾液。
   注：溶液PE初次使用前用無(wú)水乙醇按1: 4稀釋?zhuān)春?0%乙醇。
       此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質(zhì)，以獲得高質(zhì)量DN段。
5  加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min，棄濾液。
6  12,000 rpm 離心 3min，以*去除純化柱中的液體。
   注：此步驟的作用是去除殘留乙醇，避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應(yīng)。同時(shí)也利于DN段的充分溶解。
7  將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處，懸空滴加30-100 µl溶液Eluent（60℃預(yù)熱），靜置2min。12,000 rpm 離心1min，管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
   注：溶液Eluent可用無(wú)菌雙蒸水代替，但其pH需為8.0-8.5，加入體積視DNA目的段的多少、用戶(hù)對(duì)目的段濃度要求而定。
       對(duì)溶液Eluent 60℃預(yù)熱，會(huì)提高提取DNA目的段的產(chǎn)量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA，本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購(gòu)本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級(jí)版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈(zèng)送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀釋陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照，只提供可以直接使用的長(zhǎng)為 86bp 的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2.標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4.在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。5.換槍頭，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
6.換槍頭，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
7.換槍頭，在 4 號(hào)管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 4 號(hào)管中，得1×10E4 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。
8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)（20  μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待測(cè)樣品需要做三次重復(fù)，下表只列出一次。樣品管和陰性對(duì)照設(shè)置完畢后才設(shè)置陽(yáng)性對(duì)照，并且陽(yáng)性對(duì)照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲(chǔ)存好后*后加）

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