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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒
參 考 價 | 面議 |
產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-04 13:45:53瀏覽次數(shù):154次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒
英文名稱:Modified Vaccinia Virus Ankara (MVA)PCR
編號:XG-P1739
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
注意事項:
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
氯-蛋白胨緩沖液250g用于藥品中細(xì)菌的前增菌或樣品制備。
亮綠酚紅乳糖蔗糖瓊脂 incubation media 亮綠酚紅乳糖蔗糖瓊脂
AdditivesTyrosineAgar 10支/盒
血瓊脂基礎(chǔ)2號BloodAgarBaseN0.2供分離營養(yǎng)要求非常高的致病菌用,后加血液制成血平板
牛奶培養(yǎng)基 250g 用于乳酸菌凝固力及乳酸鑒別試驗2,4-Di-tert-butylphenol 2,4-二叔丁基酚 96-76-4
2,4,6-Tri-tert-butylphenol 2,4,6-三叔丁基酚 732-26-3
BETA-AMYLASE β- 9000-91-3
AMYLOGLUCOSIDASE 糖化酶 9032-08-0SEMA3A Others Mouse 小鼠 Semaphorin 3A / SEMA3A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細(xì)胞;VERO E6
HOS 骨肉瘤
NCI-H460 [H460]人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞 NCI-H460 [H460] large cell lung cancer cell 1640+10% FBS
VEGFC Protein Rat 重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, His 標(biāo)簽)
大鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞(RAc)(5×105) Ishikawa, 人宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系 Human
改良安卡拉痘苗病毒PCR檢測試劑盒Fraser肉湯增菌液(FB)基礎(chǔ)26080250g用于李斯特氏的選擇性增菌培養(yǎng)(SN/T0-2005,ISO標(biāo)準(zhǔn))。
MRS 肉湯 (CM0359) Oxoid incubation media MRS 肉湯 (CM0359) Oxoid
師崗鏈霉菌 支/瓶
SimmonsCitrateAgar
瓊脂培養(yǎng)基L 250g 用于沙門氏菌的選擇性分離培養(yǎng)三十一烷(Standard for GC≥97.0%(GC)) 進口分裝 人癌細(xì)胞
聚二苯多孔小球GDX-501(60-80目,C1-C4烴類分析) 進口分裝 人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞
(AR,99.5%) 進口分裝 人胚細(xì)胞
乙醇(95%) (AR,95.0%) 進口分裝 小鼠巨噬細(xì)胞CD3D Others Human 人 CD3d / CD3 delta 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMYB
C57BL/6小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 Neural stem cells in C57BL/6 mice
SW1353細(xì)胞,人骨肉瘤細(xì)胞 島青霉 人胚胎肺成纖維細(xì)胞;WI-38
SW-13(人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HL-60(人早幼粒急性白血病細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 MEF, 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞;HK-2
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