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使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產品名稱:貓血支原體PCR檢測試劑盒
英文名稱:Mycoplasma haemofelisPCR
編號:XG-P1794
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆?。
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
可溶性淀粉培養(yǎng)基250g用于微生物的淀粉水解試驗
25300-062 500ml incubation media 25300-062 500ml
黃綠青霉 生產腐乳。 支/瓶
麥康凱瓊脂(SMAC)平板(9cm)用于大腸桿菌O離培養(yǎng)
SabouraudDextroseAgarBUTYL OLEATE 油酸丁酯 142-77-8
Ethyl 2-hydroxybenzoate 水楊酸乙酯 118-61-6
Phenyl salicylate 水楊酸苯酯 118-55-8
METHYL LAURATE 月桂酸甲酯 111-82-03. 毛發(fā)細胞系統(tǒng)
人肝癌細胞;SMMC-7721
小鼠神經干細胞
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480] 大鼠腎管狀上皮細胞*培養(yǎng)基 100mL
PC-12(未分化) 大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(未分化)
NEGR1 Others Human 人 NEGR1 人細胞裂解液 (陽性對照)
貓血支原體PCR檢測試劑盒DriedMeatParticle
含0.6%酵母膏的胰酪胨大豆肉湯(TSB-YE) Trypticase Soy-Yeast Extract Broth 用于單增李氏菌增菌培養(yǎng)
MH瓊脂 MHA 250克 抗菌素藥物敏感性試驗
弧菌顯色培養(yǎng)基l用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍色,其它弧菌顯無色。incubationmedia弧菌顯色培養(yǎng)基l用于弧菌的顯色培養(yǎng),副溶血性弧菌顯藍色,其它弧菌顯無色。
疊氮葡萄糖肉湯 250g 用于鏈球菌增菌培養(yǎng)12607黃豆粉液體培養(yǎng)基 進口分裝 Psoralen 補骨脂素 66-97-7 20mg
22112Dubos油酸瓊脂基礎添加劑5ml×10支/盒每2支用于90ml12166中incubationmedia22112Dubos油酸瓊脂基礎添加劑5ml×10支/盒每2支用于90ml12166中 進口分裝 Spinosin 斯皮諾素 72063-39-9 20mg
10275低限肉湯(不含葡萄糖) 進口分裝 6'''-Feruloylspinosin 6'''-阿魏酰斯皮諾素 77690-92-7 20mg
12161幽門螺桿菌瓊脂培養(yǎng)基 進口分裝 Rehmannioside A 地黃苷A 81720-05-0 20mgIB3 Others Human 人 IB3 / B3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
原代骨骼肌細胞特制基礎無血清培養(yǎng)基Many types of cells包裝:500/100ml
EB病毒轉化的人B淋巴細胞;KMYM
A3細胞,淋巴細胞白血病細胞 5-8轉基因鼻咽癌細胞系,F2-2細胞 CL-0330COLO 320DM(人結直腸腺癌細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGF
LIFR Others Human 人 LIFR / CD118 人細胞裂解液 (陽性對照)
產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業(yè)進行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
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