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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50T豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-06 13:38:22瀏覽次數(shù):138次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線產(chǎn)品名稱:豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Porcine Enterovirus(PEV)RTPCR
編號(hào):XG-P1950
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號(hào) | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽(yáng)性對(duì)照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見(jiàn)下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊(cè) | 400 uL(紅蓋) |
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
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W.L.營(yíng)養(yǎng)肉湯 (CM0501) Oxoid incubation media W.L.營(yíng)養(yǎng)肉湯 (CM0501) Oxoid
斯氏油脂酵母 可制雙鏈RNA 支/瓶
LMGAgar
三糖鐵瓊脂(TSI) 250g 用于腸桿菌科細(xì)菌的生化反應(yīng)篩選(葡萄糖,乳糖,蔗糖)FMOC-GLY-WANG RESIN FMOC-GLY-WANG RESIN
FMOC-HIS(TRT)-WANG RESIN FMOC-HIS(TRT)-WANG RESIN
FMOC-D-HIS(1-TRT)-SASRIN(TM)-RESIN FMOC-D-HIS(TRT)-WANG RESIN
FMOC-ILE-WANG RESIN FMOC-ILE-WANG RESINBAMBI Others Mouse 小鼠 BAMBI / NMA 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
小鼠誘導(dǎo)性多潛能干細(xì)胞;PUMC-mips-A5
人胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HEF細(xì)胞,人胚纖維細(xì)胞系 奇異變形桿菌 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA
CXCL12 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL12 / SDF-1 蛋白
Neuro-2a/N2a(小鼠腦神經(jīng)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 中東呼吸綜合征冠狀病毒 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragme (aa 367-606) 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
豬腸病毒PCR檢測(cè)試劑盒Bolton肉湯基礎(chǔ)27380250g用于空腸彎曲菌的選擇性增菌(GB),每基礎(chǔ)培養(yǎng)基需添加劑(SR0340)
2331-prf FM-2-prf 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml incubation media 2331-prf FM-2-prf 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2 500 ml
ThioglycollateMedium
BrainHeartinfusionAgar
GC瓊脂 250g 用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)人內(nèi)肽2(EM2)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 進(jìn)口分裝 1-二十八烷醇 英文名稱: 1- twenty-eight alkyl alcohol : 67905-27-5 分子式: 410.75952 分子量: C28H58O
人紐蛋白(VCL)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 進(jìn)口分裝 冬綠苷 英文名稱: Winter green : 分子式: 分子量:
人前列腺素D合成酶(PGDS)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 進(jìn)口分裝 白果內(nèi)酯 英文名稱: Bilobalide : 33570-04-6 分子式: 326.29862 分子量: C15H18O8
人熱休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 進(jìn)口分裝 Z907 染料 英文名稱: Dye 907 : 502693-09-6 分子式: 870.11 分子量: C42H52N6O4RuS2FCGR2A Others Human 人 CD32a / FCGR2A 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
大鼠主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞
人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHAEC miRNA5 μg
SK-N-SH細(xì)胞,神經(jīng)母細(xì)胞瘤 人肺腺鱗癌細(xì)胞,NCI-H596細(xì)胞 人腦血管平滑肌細(xì)胞
豚鼠源細(xì)胞
CD28 Others Mouse 小鼠 CD28 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
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