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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50T亞利桑那沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-11 14:52:28瀏覽次數(shù):165次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
產(chǎn)品名稱:亞利桑那沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Salmonella arizonaePCR
編號(hào):XG-P2044
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號(hào) | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽(yáng)性對(duì)照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見(jiàn)下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊(cè) | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
動(dòng)力-鹽培養(yǎng)基250g用于產(chǎn)氣莢膜梭菌的動(dòng)力試驗(yàn)
緩沖葡萄糖蛋白胨水(MR-VP試驗(yàn)用培養(yǎng)基) Methyl Red Voges Proskauer Broth
戊烷脒 50mg 加入戊烷脒多粘菌素瓊脂
曲霉素瓊脂(AFPA)250g/瓶用于曲霉菌和寄生曲霉的分離培養(yǎng)incubationmedia曲霉素瓊脂(AFPA)250g/瓶用于曲霉菌和寄生曲霉的分離培養(yǎng)
TrypticSoyFastGreenAgar小鼠轉(zhuǎn)鐵蛋白受體elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 人參皂苷Rg5 GinsenosideRg5 : 74964-14-0 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥95%,對(duì)照品
兔子端粒酶elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 白頭翁皂苷B Pulchinenoside B : 135247-95-9 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
兔子催乳素elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 積雪草酸 Asiatic acid : 464-92-6 質(zhì)量規(guī)格: HPLC≥90%,BR
兔抗單核細(xì)胞抗體elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 甘酸酯鹽酸鹽 Thiamphenicol glycinate HCl : 2611-61-2 質(zhì)量規(guī)格: >98%,BRANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO-HCV-p7
人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
HS-1細(xì)胞,人皮膚癌細(xì)胞系 近平滑念珠菌 小鼠胰腺癌細(xì)胞(B類);Pan02
CCL20 Protein Human 重組人 CCL20 / MIP-3 alpha 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MDCK(犬腎細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 CRELD2 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
亞利桑那沙門氏菌PCR檢測(cè)試劑盒AntibioticAgar
乳糖膽鹽培養(yǎng)基 1000(g) incubation media 乳糖膽鹽培養(yǎng)基 1000(g)
科瑪嘉大腸桿菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶
GC瓊脂250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)incubationmediaGC瓊脂250用于淋球菌的分離培養(yǎng)(OXOID方法)
CHOMediumBase維達(dá)列汀;(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口分裝 大鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒
進(jìn)口分裝 抗Livin 抗體
1-PP1萘 進(jìn)口分裝 心血管活性多肽
硬脂酸 進(jìn)口分裝 血管生成素相關(guān)生長(zhǎng)因子 (AGF)IL6ST Others Mouse 小鼠 IL6ST / gp130 / CD130 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B
III型膠原酶(含10mL酶解緩沖液) 1mL
U-87MG-EGFP(Ubc-EGFP慢病毒構(gòu)建穩(wěn)定株)人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤 U-87MG-EGFP (Ubc-EGFP leiviral consuct stable sain) of brain asocytic blastoma DMEM+10% FBS
IL5 Protein Canine 重組狗 IL5 蛋白 (His 標(biāo)簽)
人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞 Mouse
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
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