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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T沙門氏菌通用PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2020-11-11 14:52:44瀏覽次數(shù):204次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
產(chǎn)品名稱:沙門氏菌通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Salmonella spp.PCR
編號:XG-P2062
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床
膽硫乳瓊脂培養(yǎng)基(DHL)(05藥典)250g用于沙門氏菌選擇性分離培養(yǎng)。
肉浸液肉湯 250(g) incubation media 肉浸液肉湯 250(g)
60%/L氯蛋白胨肉湯 L Nac1 Peptone Water 250克 副溶血性弧菌的前增菌培養(yǎng)
YM瓊脂250用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)incubationmediaYM瓊脂250用于霉菌、酵母菌及耐酸菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法)
TrypticaseSoyBrothwithFerrousSulfate人軍團(tuán)菌抗原elisa試劑盒 進(jìn)口分裝 2,3-二基對苯二酚(>97.0%(GC)(T)) 2,3-ohydroquinone : 4733-50-0 質(zhì)量規(guī)格: >97.0%(GC)(T)
組織型纖溶酶原激活劑(t-PA) 進(jìn)口分裝 1-氮雜-15-冠-5-醚(>98.0%(T)) 1-Aza-15-crown 5- : 66943-05-3 質(zhì)量規(guī)格: >98.0%(T)
人黏膜地址素細(xì)胞黏附分子(MAdCAM-1)ELISAKit 進(jìn)口分裝 2-(羥)-15-冠5-醚(>96.0%(GC)) 2-(Hydroxymethyl)-15-crown 5- : 75507-25-4 質(zhì)量規(guī)格: >96.0%(GC)
人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISAKit 進(jìn)口分裝 單-2-O-(對磺酰)-β-環(huán)糊精水合物(>97.0%(HPLC)) Mono-2-O-(p-sulfonyl)-β-cyclodextrin Hydrate : 84216-71-7 質(zhì)量規(guī)格: >97.0%(HPLC)SCN3B Others Human 人 SCN3B 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
腦膜細(xì)胞培養(yǎng)基MenCM-prf
大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BLU-87 人膀胱移行細(xì)胞癌 BLU-87 human bladder ansitional cell carcinoma RPMI1640 (內(nèi)含2mM-glutamine)+10%胎牛血清
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
MuM-2C(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 氣管上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
沙門氏菌通用PCR檢測試劑盒AgarmediumS(R2A)
BPLS Agar Brilliant-green phenol-red-lactose sucrose agar modified 1.10747.0500 MERCK默克 incubation media BPLS Agar Brilliant-green phenol-red-lactose sucrose agar modified 1.10747.0500 MERCK默克
血平板 90mm×20個(gè) 用于營養(yǎng)要求較高的細(xì)菌的培養(yǎng)及溶血試驗(yàn)(GB 4789.10-2010,GB/T4789.37-2008 ,GB 4789.30-2...
麥康凱瓊脂MaconkeyAgar用于腸道致病菌的選擇性分離、培養(yǎng)(OXOID方法)
李斯特氏菌檢驗(yàn)檢驗(yàn)培養(yǎng)基氯化鍶六水 進(jìn)口分裝 人T淋巴瘤細(xì)胞
2-氯乙基膦酸(>90%,植物激素級) 進(jìn)口分裝 人橫紋肌肉瘤細(xì)胞
異檸檬酸脫酶 進(jìn)口分裝 人視網(wǎng)膜母細(xì)胞
二羥基丙(>97%,BR) 進(jìn)口分裝 人肺鱗癌細(xì)胞CD53 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD53 (aa 107-181) 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
內(nèi)膜上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
豚鼠胚胎細(xì)胞;104C1
LTEP-a-2細(xì)胞,人肺腺癌細(xì)胞 猴腎細(xì)胞系,VERO E6細(xì)胞 CM-M050小鼠卵巢顆粒細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
SHG-44 (人膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
NHEK.f-c pooled 正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(NHEK)少年,混合 500,000cells 原代上皮細(xì)胞特制無血清添加劑Many types of cells包裝:1ml
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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