使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏，還具有以下特點(diǎn)：
1.  即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡(jiǎn)單。
2.  預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3.  本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。

注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長(zhǎng)時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

YeastExtractDextroseChloramphenicolAgar

溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g) incubation media 溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基 250(g)

M-H瓊脂平板 M-H Agar Plate 10塊

木糖-明膠培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗(yàn)incubationmedia木糖-明膠培養(yǎng)基250用于蠟樣芽孢桿菌明膠液化試驗(yàn)

T1N3肉湯 250g 用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn))順式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸甲酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  進(jìn)口分裝  PLC/PRF/5(人肝癌亞力山大細(xì)胞)

鄰甲酚(用于環(huán)境分析)  進(jìn)口分裝  TM4(正常小鼠Sertoli細(xì)胞)

萎銹靈(標(biāo)準(zhǔn)品)  進(jìn)口分裝  人淺表性膀胱癌細(xì)胞

亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)溶液(100mg/L，溶劑：水)  進(jìn)口分裝  人透明細(xì)胞癌細(xì)胞小鼠小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞(MM)(5×105)

人雪旺細(xì)胞總RNAHSC NA

黃胸鼠肺成纖維細(xì)胞;YCR

C57BL/6小鼠T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞;RMA 小鼠角膜上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HBE, 正常人支氣管上皮細(xì)胞系 Human

NLGN1 Others Human 人 NLGN1 / Neuroligin-1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
美洲四棱線蟲PCR檢測(cè)試劑盒乙型副傷寒沙門菌凍干粉

長(zhǎng)赤細(xì)菌

微黃八疊球菌

地霉屬

寄生曲霉

大豆慢生根瘤菌D-環(huán)絲酸溶液5ml*10每支添加于100mlTSC中  進(jìn)口分裝  尿苷；核苷  Uridine  ：  58-96-8  質(zhì)量規(guī)格：  >99%,BR，可用于細(xì)胞培養(yǎng)

LS培養(yǎng)基  進(jìn)口分裝  D-核糖-5-磷酸二鈉鹽  D-Ribose 5-phosphate disodium salt hydrate  ：  18265-46-8  質(zhì)量規(guī)格：  >85%,美國進(jìn)口

MRS瓊脂  進(jìn)口分裝  Leu-pNA；L-亮酸-  L-Leucine-p-nitroanilide  ：  4178-93-2  質(zhì)量規(guī)格：  >99%

BifidobacteriumBSMedium  進(jìn)口分裝  HDBAC；十六烷基二化銨  Benzyldimethylhexadecylammonium chloride(HDBAC)  ：  122-18-9  質(zhì)量規(guī)格：  >99%EPCAM Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / OP-1 / TACSTD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

膀胱平滑肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 × 105次方(1ml)

人卵巢畸胎瘤細(xì)胞;PA-1

貓腎細(xì)胞;F81 EB病毒轉(zhuǎn)化的B細(xì)胞，CGM1細(xì)胞 CCC-SMC-2細(xì)胞，兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞

人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細(xì)胞;NK-92MI [NK92MI]

CD244 Others Human 人 2B4 / SLAMF / CD244 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡(jiǎn)便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè)；
◇高通量：多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。