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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測(cè)試劑盒>> 50T鏈球菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒
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產(chǎn)品型號(hào)50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2021-12-28 17:07:42瀏覽次數(shù):192次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽(yáng)性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽(yáng)性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。
6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽(yáng)性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見(jiàn)下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽(yáng)性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Streptococcus spp.PCR |
貨號(hào) | XG-P2142 |
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號(hào) | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽(yáng)性對(duì)照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見(jiàn)下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊(cè) | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過(guò)溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
阪崎腸桿菌顯色培養(yǎng)基CRM006l供嬰兒奶粉以及其它食品中阪崎腸桿菌的鑒定和計(jì)數(shù)
Rappaport-Vassiliadis (RV) 增富肉湯 (CM0669) Oxoid incubation media Rappaport-Vassiliadis (RV) 增富肉湯 (CM0669) Oxoid
土星漢遜酵母 殺鱗翅目昆蟲(chóng) 支/瓶
煌綠乳糖膽鹽肉湯(BGLB)250g用于大腸菌群、大腸桿菌的測(cè)定(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))
BacterialL-growingBroth琥珀酸舒馬曲普坦 進(jìn)口分裝 人甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
*(標(biāo)準(zhǔn)品) 進(jìn)口分裝 人風(fēng)疹病毒IGM(RV-IgM)ELISA試劑盒
乙酰* 進(jìn)口分裝 人多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA試劑盒
*/非氯地平 進(jìn)口分裝 人登革熱抗體(DF-Ab)ELISA試劑盒CARTPT Others Human 人 CART / CARTPT 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
CL-0250801-D (人巨細(xì)胞性肺癌細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人腎上皮細(xì)胞cDNAHREpiC cDNA
豬細(xì)胞;ST 單核巨噬細(xì)胞白血病,RAW 264.7細(xì)胞 L615細(xì)胞,615小鼠網(wǎng)織細(xì)胞性白血病瘤株
表達(dá)小鼠MHCⅠ類分子Kb的人胚腎細(xì)胞;293KB
HA Others H5N3 甲型流感 H5N3 (A/duck/Hokkaido/167/2007) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
鏈球菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒痢疾志賀菌凍干粉
Georgeniamuralis
謝氏丙酸桿菌
白地霉
華美鏈霉菌
蛾微桿菌T1N3肉湯T1N3Broth250用于霍亂弧菌的生長(zhǎng)試驗(yàn)(SN標(biāo)準(zhǔn)) 進(jìn)口分裝 洛匹那韋 Lopinavir : 192725-17-0 質(zhì)量規(guī)格: >99%
EF-18瓊脂EF-18Agar250用于濾膜法檢測(cè)食品中沙門氏菌(SN/T1059.1) 進(jìn)口分裝 鹽酸* Paroxetine HCl : 110429-35-1 質(zhì)量規(guī)格: >98%,半水合物
酪蛋白瓊脂CaseinAgar250用于蠟樣芽孢桿菌的酪蛋白分解試驗(yàn)(GB標(biāo)準(zhǔn)) 進(jìn)口分裝 (S)-1-基-3-丁基硼酸蒎烷二醇酯三醋酸鹽 (S)-BoroLeu-(-)-Pinanediol-CF3COOH : 477254-69-6 質(zhì)量規(guī)格: >97%
SCHAEDLER瓊脂SCHAEDLERAGAR250用于厭氧菌的分離培養(yǎng)(Acumedia方法) 進(jìn)口分裝 * Bromhexine HCl : 611-75-6 質(zhì)量規(guī)格: 純度>99%CNDP2 Others Mouse 小鼠 CNDP2 / CN2 / CPGL 桿狀病毒-昆蟲(chóng)細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
滑膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
人髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞;Daoy
HMy2.CIR細(xì)胞,人B淋巴母細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,H7402細(xì)胞 CL-0200RWPE1(人前列腺上皮細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1
LDLR Others Mouse 小鼠 LDLR / LDL Receptor 人細(xì)胞裂解液 (陽(yáng)性對(duì)照)
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。
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