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產品及特點:
本產品是一管式超快植物種子和葉基因組DNA 提取試劑,得到的產物可以直接用于PCR。整個過程簡單快速,尤其適合于大規(guī)模的轉基因植物篩選時樣品的制備。
1. 快速,整個過程只需要15分鐘左右,不需要液氮對植物組織進行冰凍、機械處理、純化或者DNA的沉淀。運輸及保存2. 一管式,在一個試管內完成所有操作,不容易交叉污染。常溫運輸及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余樣品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自動化,適合于海關和企業(yè)進行大規(guī)模的GMO PCR 篩選。
5. 適用于大多數(shù)植物葉和種子。
產品名稱:泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒
英文名稱:Theileria spp.PCR
編號:XG-P2187
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
使用及效果:將壓碎的一小重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm(或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當于PCR 體積的1/10)作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
1 確定PCR反應液或其他酶促反應液的體積。將PCR反應液或其他酶促反應液轉移至一個新的1.5 ml離心管中,向其中加入等體積溶液BD?;旌暇鶆颉?/span>
2 將步驟1所獲溶液置于DNA純化柱中,靜置2min。
3 12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:此時DN段被吸附于DNA純化柱中的硅膠膜上。
若溶液體積大于純化柱容積(800 μl),可分兩次離心。
4 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
注:溶液PE初次使用前用無水乙醇按1: 4稀釋,即含80%乙醇。
此步驟的作用是去除硅膠膜上吸附的酶蛋白、核酸引物、dNTP等其他雜質,以獲得高質量DN段。
5 加入500 µl溶液PE。12,000 rpm離心1min,棄濾液。
6 12,000 rpm 離心 3min,以*去除純化柱中的液體。
注:此步驟的作用是去除殘留乙醇,避免殘留乙醇影響后續(xù)酶促反應。同時也利于DN段的充分溶解。
7 將離心柱置于新的1.5 ml離心管中。向純化柱的處,懸空滴加30-100 µl溶液Eluent(60℃預熱),靜置2min。12,000 rpm 離心1min,管底即為目的DN段。貯存于-20℃。
注:溶液Eluent可用無菌雙蒸水代替,但其pH需為8.0-8.5,加入體積視DNA目的段的多少、用戶對目的段濃度要求而定。
對溶液Eluent 60℃預熱,會提高提取DNA目的段的產量。
樣品 DNA 的制備:
1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DNA 段作為陽性對照。
2.標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
8.重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設置 qPCR 反應(20 μL 體系,在樣品制備室進行)
9.在 PCR 管中加入下列成分(待測樣品需要做三次重復,下表只列出一次。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后*后加)
XLDAgar
堿性蛋白胨水(APW) 1000(g) incubation media 堿性蛋白胨水(APW) 1000(g)
OF發(fā)酵管 OF發(fā)酵管 20支 BR
M湯(MHB)250用于抗生素敏感試驗incubationmediaM湯(MHB)250用于抗生素敏感試驗
細菌蛋白胨 250g 用于制備0.1%蛋白胨水,用于空腸彎曲菌的預增菌基酸脫羧酶對照發(fā)酵管BR20支國產/進口 進口分裝 蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草) Cordyceps militaris
MCP瓊脂/產氣莢膜梭菌瓊脂/MCPAgar產氣莢膜梭菌的計數(shù)和培養(yǎng)250克國產/進口 進口分裝 德氏乳桿菌保加利亞亞種 Lactobacillus delbrueckii subsp.bulgaricus
3.5%NaC1鳥酸脫羧酶發(fā)酵管BR20支國產/進口 進口分裝 赭曲霉 Aspergillus ochraceus
營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 進口分裝 4-Nitro-1H-imidazole-1-ethanol 中文名稱: 4-nitro-1h-imidazole-1-ethanol CAS 編號: 5006-69-9 分子結構式: C5H7N3O37. 肺部細胞系統(tǒng)
人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C
CL-0349Hela 299(人細胞)5×106cells/瓶×2
人侵襲性脈絡膜黑色素瘤細胞;C918 大鼠前脂肪細胞*培養(yǎng)基 100mL
F9 小鼠畸胎瘤細胞
SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細胞裂解液 (陽性對照)
泰勒屬原蟲通用PCR檢測試劑盒印第安那亞種Bacillusthuringiensissubsp.indiana
醋酸醋桿菌
特異青霉
產氨短桿菌
單增李斯特菌
蛹蟲草(北冬蟲夏草、北蟲草)Cary-BlairTransportMedium 進口分裝 4,4'-二基二苯醚(ODA)(標準品) 4,4′-Diaminodiphenyl : 101-80-4 質量規(guī)格: 分析標準品
哥倫比亞血瓊脂平板(9cm)10個/包用于營養(yǎng)要求高細菌的分離、培養(yǎng)和溶血試驗 進口分裝 六苯標準溶液(32.9mg/L,基體:) Hexachlorobenzene solution : 118-74-1 質量規(guī)格: 32.9mg/L,基體:
巧克力瓊脂平板(9cm)10個/包用于嗜血桿菌、奈瑟氏菌分離培養(yǎng) 進口分裝 異丙苯(標準品) Isopropylbenzene standard solution : 98-82-8 質量規(guī)格: 分析標準品
OxfordAgarBase 進口分裝 1,2,3-三苯(分析標準品,>99.8%(GC)) 1,2,3-Trichlorobenzene : 87-61-6 質量規(guī)格: 分析標準品,>99.8%(GC)CSNK1G1 Others Human 人 CSNK1G1 / CKI-gamma 1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照)
UM-UC-3, 人膀胱移行細胞癌
人APP-PS1雙基因轉染細胞株(HEK293);APP-PS1
RKO細胞,結腸腺癌細胞 人鼻咽癌細胞系,SUME-a細胞 CL-0371K7M2 wt(小鼠骨肉瘤成骨細胞)5×106cells/瓶×2
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-prepro-TGFβ1 cDNA
IL34 Others Mouse 小鼠 IL-34 人細胞裂解液 (陽性對照)
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