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當(dāng)前位置:上海西格生物科技有限公司>>PCR試劑盒>>PCR檢測試劑盒>> 50T太米阿米病毒PCR檢測試劑盒
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產(chǎn)品型號50T
品 牌其他品牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2020-11-13 11:22:51瀏覽次數(shù):133次
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一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
1. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
7. NC 管中不加任何陽性對照。
8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線
本試劑盒不但準(zhǔn)確、快速、靈敏,還具有以下特點(diǎn):
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 494 bp。
3. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Tamiami virus(TAMV)RTPCR |
貨號 | XG-P2168 |
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分:
編號 | 成分 | 十孔盒包裝(去紙托) |
試劑一 | 2×PCR MagicMix | 1mL(亮黃蓋) |
試劑二 | 源性成分 PCR 引物混合液 | 100 uL(白蓋) |
試劑三 | 源性成分 PCR 陽性對照 | 50 uL(黃蓋) |
試劑四 | 超純水 | 1 mL(本色蓋) |
試劑五 | DNA 釋放劑試用裝 | 50 次(成分見下) |
試劑六 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分一 | 50 uL(白蓋) |
試劑七 | 免 DNA 提取試劑溶液 A 成分二 | 100uL(綠蓋) |
試劑八 | 免 DNA 提取試劑溶液 B | 400 uL(紅蓋) |
試劑九 | 使用手冊 | 400 uL(紅蓋) |
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
YMar
改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g) incubation media 改良番茄汁瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250(g)
卵黃溶液 Egg-Yolk Polymyxin B Solution 50毫升 卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)配套試劑
溶血性鏈球菌incubationmedia溶血性鏈球菌
3%氯MR-VP培養(yǎng)基 20支 用于副溶血性弧菌的紅和V-P試驗(yàn)丁二酸二甲酯(>99%,BR) 進(jìn)口分裝 人癌細(xì)胞
溴乙烷(>98%,BR) 進(jìn)口分裝 人頸鱗癌細(xì)胞
戊二酸(>98%,BR) 進(jìn)口分裝 人慢性髓原白血病細(xì)胞
人外周血造血干細(xì)胞分離液 進(jìn)口分裝 大鼠肝細(xì)胞MSLN Others Human 人 MSLN / Mesothelin 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
小鼠皮質(zhì)神經(jīng)元MN-c
大鼠胰腺上皮細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL
BALL-1人B淋巴細(xì)胞急性白血病細(xì)胞 BALL-1 B acute lymphoblastic leukemia cells 90%RPMI1640(內(nèi)含2mM L-glutamine)+10%胎牛血清
EGF Protein Canine 重組狗 EGF / Epidermal Growth Facto 蛋白 (His 標(biāo)簽)
SF-295(人XG惡性膠質(zhì)瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 胎盤羊膜細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml)
太米阿米病毒PCR檢測試劑盒嗜熱乳酸鏈球菌
表皮葡萄球菌ATCC12228凍干粉
紅法夫酵母
巴氏醋桿菌巴氏亞種
雅致枝霉
乳酸片球菌馬鈴薯瓊脂培養(yǎng)基 進(jìn)口分裝 三溴甲烷(光譜級,>99.0%(GC)) Tribromomethane : 75-25-2 質(zhì)量規(guī)格: 光譜級,>99.0%(GC)
沙氏葡萄糖瓊脂(含霉素) 進(jìn)口分裝 十五烷酸(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)) Pentadecanoic Acid : 1002-84-2 質(zhì)量規(guī)格: 分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.5%(GC)
2010版中國藥典增補(bǔ)培養(yǎng)基 進(jìn)口分裝 鄰硝基苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000μg/ml,溶劑:) o-Chloronitrobenzene solution : 88-73-3 質(zhì)量規(guī)格: 1000μg/ml,溶劑:
lateMedium 進(jìn)口分裝 正癸酸(Standard for GC,>99%(GC)) Decanoic acid : 334-48-5 質(zhì)量規(guī)格: Standard for GC,>99%(GC)EPHA2 Others Human 人 EphA2 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照)
Ca Ski, 人細(xì)胞
人胚腎細(xì)胞-F克隆;293F
HK-2C細(xì)胞,人胚腎上皮細(xì)胞 貂肺上皮細(xì)胞,Mv.1.Lu(NBL-7)細(xì)胞 CL-0365HuTu-80(人十二脂腸腺癌)5×106cells/瓶×2
BE(2)-M17(人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2
HOB-c 人成骨細(xì)胞(HOB) 500,000cells 人皮成纖維母細(xì)胞-新生HDF-n
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
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