產(chǎn)品名稱：布氏布氏錐蟲PCR檢測試劑盒
英文名稱：Trypanosoma brucei bruceiPCR
編號(hào)：XG-P2232
分類：PCR檢測試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。

產(chǎn)品特點(diǎn)：
◇高特異性：與其他病毒無交叉反應(yīng)，無非特異性擴(kuò)增；
◇高靈敏度：檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝；
◇操作簡便：該系列所有試劑均采用相同的體系和條件，可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測；
◇高通量：多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
注意事項(xiàng)：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感，避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時(shí)，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
包裝規(guī)格及成分：

使用方法:
一、樣品 DNA 的制備
用自選方法提取 Cps DNA。注意：DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA，后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線（以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照，只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2 和 1 號(hào)。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水（用帶芯槍頭，下同）。
3. 先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL（注：請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL，建議每次稀釋 10 倍，梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL）。
4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
5. 換槍頭，從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中，充分震蕩 1 分鐘，得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。
6. 換槍頭，從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中，重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。
7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。
8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進(jìn)行定量 PCR（見下步），每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值，并以之為縱軸，以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

TTCLecithinTween80NutrientAgar

伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB) 1000(g) incubation media 伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB) 1000(g)

LB Lennox肉湯 LB Lennox Broth 250克 大腸桿菌增殖

鈉培養(yǎng)基培養(yǎng)基，用于細(xì)菌鹽利用試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))incubationmedia鈉培養(yǎng)基培養(yǎng)基，用于細(xì)菌鹽利用試驗(yàn)(GB、SN標(biāo)準(zhǔn))

LysineIronAgar10ml一次性注射器(100支/盒)  進(jìn)口分裝  EDTA,Dipotassium,Dihydrate

1×PBS緩沖液  進(jìn)口分裝  

5×RNAloadingbuffer  進(jìn)口分裝  乙酸鋰二水

D2000IIDNAladder（100-2000bp）  進(jìn)口分裝  MU-Gal小鼠神經(jīng)黑質(zhì)細(xì)胞(MN-sn)(1×106)

人海馬趾神經(jīng)元RNAHN-h miRNA5 μg

兔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞;CCC-SMC-1

小鼠黑色素瘤細(xì)胞;B16-F1 小鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞*培養(yǎng)基 100mL

HSC-T6, 大鼠肝星狀細(xì)胞系 Rattus

ACVR2A Others Human 人 ACVR2 / ACII / ACVR2A 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)
布氏布氏錐蟲PCR檢測試劑盒表面培養(yǎng)基60mm/25cm2

鰒發(fā)光桿菌

藤黃八疊球菌

木耳

多主枝孢

蒼白芽孢桿菌錄化亞錳，英文名或英文縮寫：Manganese chloride，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：5克

594-19-4叔丁基鋰tert-Butyl litxium

DL-蠶絲基酸，英文名或英文縮寫：DL-Serine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：10克

硬脂酸鈣 Calcium stearate,Ca 6.6-7.4% 1592-23-0 250G 通用試劑

正四十四烷 N-Tetratetracontane 7098-22-8 250MG 通用試劑PROM1 Others Rat 大鼠 CD133 / PROM1 / Prominin 1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照)

成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基-2FM-2-prf

腺病毒轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;AAV-293

HONE1細(xì)胞，人鼻咽癌細(xì)胞 小鼠淋巴瘤細(xì)胞,EL4.IL-2細(xì)胞 CM-H030人外周血白細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

NG108-15(小鼠神經(jīng)細(xì)胞瘤與大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤之融合細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2

Promocell C-26040 Placeal Epithelial CellGrowth Medium, 胎盤上皮細(xì)胞生長培養(yǎng)基(即用型) 500ml

技術(shù)原理：

       DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
       在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）
       發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。