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預染發(fā)光Western Marker

參  考  價:499.2 - 1950
具體成交價以合同協(xié)議為準
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    其他品牌

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    生產商

  • 所在地

    上海市

規(guī)格

100μl 499.2元 15盒可售

500μl 1950元 15盒可售

更新時間:2024-05-22 09:42:48瀏覽次數(shù):211次

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貨號 XG-P3051 規(guī)格 100μl、500μl
包裝 盒裝 用途 僅供科研研究實驗
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預染發(fā)光Western Marker

預染發(fā)光Western Marker

貨號

規(guī)格

分類

XG-P3051

100μl

蛋白相關

XG-P3051

500μl

蛋白相關

描述:

傳統(tǒng)的 Western Blot 試驗需要使用預染蛋白 Marker 來跟蹤檢測陽性抗原信號和轉膜效率,但預染蛋白 Marker 無法在膠片上曝光,曝光信號需要根據(jù)膜上的預染蛋白 Marker來判斷。全新研發(fā)的Prestained & Western Blot Marker是專門為 Western Blot 試驗設計的分子量標準,由 9 種發(fā)光蛋白和 9 種預染蛋白組成;9 中發(fā)光蛋白分別為 23、30、36、44、50、62、90、120 和 160KDa,這些蛋白均可與抗體結合, 因此能與抗原在同一張膜上曝出信號,陽性信號可以直接通過 Western Marker 的位置來判斷;9 種預染蛋白分別為 15、25、35、40、55、70、100、130 和 180KDa,其中 70KDa為紅色,其他為藍色,轉膜完畢后在膜上肉眼可見。主要特征
可與抗原同時檢測信號,使 Western blot 結果判斷更加簡便發(fā)光 marker 沒有偶聯(lián)和標記其他分子,分子量更加準確綜合發(fā)光 marker 和預染 marker 的優(yōu)勢,既能監(jiān)測轉膜又能與抗原同時檢測
儲存:-20°C 保存,有效期 2 年。
使用方法
待 Prestained & Western Blot Marker 至室溫融化后,取 2~10 μl(通常 5μl)至上樣孔中,進行 SDS-PAGE 電泳;電泳完畢后轉至 PVDF 膜或 NC 膜,與一抗二抗孵育;孵育完畢后,將本品與抗原一起通過 ECL 曝光至膠片或熒光顯色。
注意事項:
1. 本產品可直接使用,不需要加熱。
2. 可根據(jù)抗體的效價或曝光時間的長短調整 Prestained & Western Blot Marker 的上樣量。
3. 使用新配制的凝膠,及時更換電泳緩沖液和轉膜液,以免影響實驗結果
。


預染發(fā)光Western Marker


預染發(fā)光Western Marker

一、模板DNA:PCR反應需要模板DNA,如從細胞、組織、血液中提取DNA等;

二、引物:PCR反應的兩個引物,分別與模板DNA的兩端配對擴增所需的特定區(qū)域,引物也可以合成為TA克隆等過程中使用到的引物;

三、dNTPs:PCR反應中需要四種dNTPs,包括脫氧腺苷酸(dATP)、脫氧胸苷酸(dCTP)、脫氧鳥苷酸(dGTP)、脫氧胞嘧啶酸(dTTP),用于細胞分裂、DNA合成         等生物學過程,用于PCR擴增的模板DNA鏈的延伸和擴增;

四、Taq DNA聚合酶:PCR反應需要的聚合酶,一般使用Taq聚合酶,還有一些其他種類的聚合酶如PFU、Phusion等,用于擴增DNA鏈;

五、PCR buffer溶液:對PCR反應具有緩沖作用,調節(jié)反應pH,硫代硫酸氫鹽SDS、小分子有機化合物如甲醛,可增強PCR反應特異性,從而提高反應效率;

六、酶切體系:PCR擴增往往涉及到重組、構建和測序等等實驗步驟,常常需要進行酶切操作。

七、MARK:一種分子量標準,用來判別DNA片段大小的工具。

八、DNA純化試劑盒:用于純化PCR反應產物;


預染發(fā)光Western Marker


預染發(fā)光Western Marker

①Oligo dT
選擇Oligo dT時,要求RNA必須有Poly A,所以真核生物的mRNA都適用。適合長鏈甚至全長mRNA的RT,對RNA樣品的質量要求較高,不要有明顯的DNA污染、RNA降解和RNA斷裂。假如想探索新的mRNA進行RT反應,建議推薦使用Oligo dT引物。使用Oligo dT引物要比隨機引物和特異性引物的穩(wěn)定性要好。
②隨機引物
適合各種RNA的RT,尤其適合模板豐度很低的情況(比如某個gene表達量很低)。選擇隨機引物時,鏈cDNA合成反應中就是以所有的RNA為模板,然后進行PCR反應時設計引物進行特異性擴增。同時要注意隨機引物的量和總RNA量之間的關系,一般建議每5µg總RNA的隨機引物的用量為50ng,如果每5µg總RNA的隨機引物的用量超過250ng,可能會導致小片段產物(<500bp)的增加和長片段、全長產物的降低。
③特異性引物
基因特異性引物(GSP)是某個基因序列的一部分,與模板互補的引物。該引物需要結合目標RNA的已知序列進行設計。由于引物和RNA序列特異性結合,每個目標RNA都需要一套新的基因特異性引物。因此,當分析多種目標時,則需要適用更多的RNA樣本。而且不同引物退火溫度本來就不相同,所以一般不推薦使用。如需要使用特異性引物,建議對退火溫度進行優(yōu)化。

預染發(fā)光Western Marker

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