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ELISA實(shí)驗(yàn)前必做的儀器和試劑準(zhǔn)備
ELISA技術(shù)自20世紀(jì)70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展非常迅速,目前被廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等許多領(lǐng)域。其基本原理是根據(jù)抗原或抗體能在一定條件下結(jié)合到固相載體的表面仍保持其免疫活性,抗原或抗體與酶結(jié)合形成的結(jié)合物仍能保持免疫學(xué)和酶的活性。結(jié)合物與相應(yīng)的抗原、抗體結(jié)合后,可根據(jù)加入相應(yīng)的酶底物的顏色反應(yīng)來(lái)判斷有無(wú)相應(yīng)的免疫反應(yīng),而且顏色的深淺與相應(yīng)的抗原或抗體的量在一定的范圍內(nèi)成正比。由于抗原、抗體的反應(yīng)在1種固相載體——聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行,每加入一種試劑孵育后,可通過(guò)洗滌除去多余的游 -
人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)elisa試劑盒使用說(shuō)明書
人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)elisa試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)表達(dá)。用純化的人類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的類嗜T淋巴細(xì)胞病毒(HTLV)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò) -
關(guān)于白細(xì)胞介素的知識(shí)你了解多少
白細(xì)胞介素即是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作用于多種細(xì)胞的一類細(xì)胞因子。目前至少發(fā)現(xiàn)了38個(gè)白細(xì)胞介素,分別命名為IL-1~IL38,功能復(fù)雜,成網(wǎng)絡(luò),復(fù)雜重疊;在免疫細(xì)胞的成熟、活化、增殖和免疫調(diào)節(jié)等一系列過(guò)程中均發(fā)揮重要作用,此外它們還參與機(jī)體的多種生理及病理反應(yīng)。免疫系統(tǒng)細(xì)胞的增殖、分化和功能受到一系列細(xì)胞因子的調(diào)節(jié)。根據(jù)細(xì)胞因子的結(jié)構(gòu)同源性可將其分為幾個(gè)蛋白質(zhì)家族,如IL-1家族、IL-6家族、IL-10家族、腫瘤壞死因子家族和造血因子家族等。白細(xì)胞介素穿插歸類為其中。白細(xì)胞介素是由多種細(xì)胞產(chǎn)生并作 -
ELISA實(shí)驗(yàn)中樣本的收集和運(yùn)輸
酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)可以用于:(1)檢測(cè)大分子抗原和特異性抗體等;(2)具有快速、靈敏、簡(jiǎn)便、載體易于標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點(diǎn)。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA的樣本收集與運(yùn)輸:利用ELISA進(jìn)行檢驗(yàn)常見(jiàn)的樣本一般包括血液(指血,靜脈血),尿,糞便,腦脊液,胸腹水,前列腺液,分泌物等,這些樣本收集的時(shí)間、方法和保存都有一定的要求。ELISA實(shí)驗(yàn)中的血清需采用血 -
大鼠催乳素(PRL)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書本試劑盒僅供研究使用。檢測(cè)范圍:48T30pg/ml-800pg/ml使用目的:本試劑盒用于測(cè)定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中催乳素(PRL)含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠催乳素(PRL)水平。用純化的大鼠催乳素(PRL)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入催乳素(PRL),再與HRP標(biāo)記的催乳素(PRL)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下
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本試劑盒僅供研究使用。96T使用目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清、血漿及相關(guān)液體樣本中痢疾阿米巴(EH)表達(dá)。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人痢疾阿米巴(EH)表達(dá)。用純化的人痢疾阿米巴(EH)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中痢疾阿米巴(EH)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗原和其他成分后再與HRP標(biāo)記的痢疾阿米巴(EH)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)che底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。用酶標(biāo)儀在450n
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結(jié)合物即酶標(biāo)記的抗體(或抗原),是ELISA中至關(guān)重要的關(guān)鍵的試劑。良好的結(jié)合物應(yīng)該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結(jié)合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當(dāng)?shù)姆肿颖壤?,在結(jié)合試劑中應(yīng)盡量不含有或少含有游離的(未結(jié)合的)酶或游離的抗體(或抗原),此外,結(jié)合物尚要有良好的穩(wěn)定性。用于ELISA的酶應(yīng)符合以下要求:①純度高②催化反應(yīng)的轉(zhuǎn)化率高③專一性強(qiáng)④性質(zhì)穩(wěn)定⑤來(lái)源豐富⑥價(jià)格不貴⑦制備成酶結(jié)合物后仍繼續(xù)保存它的活性部分和催化能力⑧在受檢標(biāo)本中不存在相同的酶⑨相應(yīng)底物易于制備和保存
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做cellbiology實(shí)驗(yàn),細(xì)胞鋪板大概是很常見(jiàn)的一個(gè)實(shí)驗(yàn)了。但是有很多人不是很得要領(lǐng),鋪得不是均勻:要么中間密周圍稀,要么周圍密中間禿頂。在這里分享一些一些技巧:1、一般96孔板每孔是加100微升細(xì)胞懸液,從孔的左邊靠近底部加入,加完半邊板后,將未加的細(xì)胞懸液混一下再,繼續(xù)加剩余的半邊板子,都加完后蓋上蓋子,左手輕輕扶住板的左邊,右手輕輕敲擊板的右邊緣,注意把握力度(一般輕巧敲三下),太強(qiáng)或次數(shù)太多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞集中成堆,將板順時(shí)針旋轉(zhuǎn)(逆時(shí)針效果不好),依次敲擊剩余三個(gè)邊,靜置約5分鐘,放入3