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細(xì)胞中的蛋白質(zhì)通過合成和降解等活動(dòng)控制處于恒定狀態(tài)。為了使細(xì)胞更,減少不必要的蛋白質(zhì)負(fù)荷,細(xì)胞中的大多數(shù)蛋白質(zhì)都有一個(gè)明確定義的半衰期。細(xì)胞進(jìn)化到降解蛋白質(zhì)的另一個(gè)原因是,確保及時(shí)清除已經(jīng)完成工作的蛋白質(zhì)(如細(xì)胞周期蛋白),避免由于某些蛋白質(zhì)的構(gòu)成作用而可能發(fā)生的不良影響(如放松管制在細(xì)胞周期蛋白的蛋白酶體降解會(huì)加速不受控制的癌細(xì)胞的擴(kuò)散)。今天上海勁馬將介紹一些常用的測量蛋白質(zhì)穩(wěn)定性的方法。一、脈沖追蹤:這是一種追蹤蛋白質(zhì)并估計(jì)其穩(wěn)定性的傳統(tǒng)方法,除了涉及到處理放射性,這種方法在測量蛋白質(zhì)半衰
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樣品或標(biāo)準(zhǔn)品OD超出正常范圍,是什么原因?
科研研究已進(jìn)入全新時(shí)代,愛好生物研究的學(xué)者越來越多。不管您是花幾百還是上千,甚至上萬去購置試劑,這都是zui簡單的*步。您之后需要付出更多的是大量的時(shí)間和精力,再加上您的耐心和用心,才有可能把這條路走的更遠(yuǎn)。昨天下午,來自浙江大學(xué)的王同學(xué)本公司業(yè)務(wù)員想要咨詢:樣品或標(biāo)準(zhǔn)品OD超出正常范圍,是什么原因?隨后本公司業(yè)務(wù)員為王同學(xué)安排了技術(shù)專員進(jìn)行一對一解答!樣品或標(biāo)準(zhǔn)品OD超出正常范圍,是什么原因?原因1:錯(cuò)誤的樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋解決1:*按照說明書稀釋原因2:偶聯(lián)抗體濃度過高解決2:照說明書調(diào)整到 -
科研朋友們,您還在為做ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)在各大貼吧尋求幫助嗎?還在為等“傳說中的大神”回復(fù)讓時(shí)間白白流逝嗎?還在為遇到一個(gè)問題不知道找誰交流嗎?選擇我們,告別迷茫。今天上海勁馬將帶您了解ELISA步驟核心包括哪些?就拿洗滌來說。這步驟有著決定性的作用,分有浸泡式、流水沖洗式兩種,ELISA中用的蒸餾水或去離子水,包括用于洗滌的,應(yīng)為新鮮的和高質(zhì)量的本公司要求使用的純化水電導(dǎo)率小于1.5μs/cm。一、保溫:在建立ELISA方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小
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實(shí)驗(yàn)高手在線解答:免疫沉淀(IP)的常見問題
1.用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實(shí)驗(yàn)?答:抗體的性質(zhì)對免疫沉淀實(shí)驗(yàn)影響很大??贵w不同,和抗原以及ProteinG或ProteinA的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。一般來說,多抗是沉淀反應(yīng)zuihao的選擇。另外,純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。2.為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶抑制劑?答:從活性細(xì)胞裂解出來的樣品中,往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測蛋白的分解,修飾,溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每抑制劑,并且在低溫下進(jìn)行實(shí) -
大家都知道ELISA檢測試劑盒有很多優(yōu)勢,準(zhǔn)確度高也是也是其中優(yōu)勢之一,那么如何知道ELISA檢測試劑盒的準(zhǔn)確度是多少呢?當(dāng)ELISA檢測試劑盒同一樣本達(dá)一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當(dāng)我們要求檢驗(yàn)結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時(shí),將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。準(zhǔn)確度是指測定結(jié)果與真值(或靶值)接近的程度。準(zhǔn)確度不能以數(shù)字表示,往往用不準(zhǔn)確度來衡量。測定結(jié)果
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科研朋友們,您在做實(shí)驗(yàn)時(shí)是否遇到過ELISA吸光值一直在衰減這樣的現(xiàn)象呢?昨天上海勁馬業(yè)務(wù)員就收到貴陽醫(yī)學(xué)院的王老師前來咨詢的一個(gè)問題:加完顯色液(購買)顯色一定時(shí)間后,再加終止液(2MH2SO4,自己配制)后,立即測試其吸光度值,等過幾分鐘再測試吸光度值,發(fā)現(xiàn)兩次測得的吸光度值發(fā)生衰減。第二次均小于次。并且,加終止液時(shí),從條加到第12條后,測試發(fā)現(xiàn),吸光度值從1-12條逐級衰減。前提是這12條酶標(biāo)板都是同一種產(chǎn)品,并且包被相同蛋白,我該怎么辦?經(jīng)過我公司技術(shù)專員的分析,原來ELISA吸光度值衰
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小課堂:新手需要了解的ELISA的實(shí)驗(yàn)步驟
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。在測定時(shí),受檢標(biāo)本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體,也通過反應(yīng)而結(jié)合在固相載體上。此時(shí)固相上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可 -
BIM試劑盒重點(diǎn)解析干細(xì)胞因子簡介:干細(xì)胞因子又稱肥大細(xì)胞生長因子(MGF),Kit配體(KL)及Steel因子(SLF),是由骨髓微環(huán)境中的基質(zhì)細(xì)胞產(chǎn)生的一種酸性糖蛋白。其糖基連在肽鍵的N和O集團(tuán)上,相對分子質(zhì)量31kDa~36kDa,由非共價(jià)結(jié)合的兩個(gè)相同亞基組成。成熟大鼠的SCF共有248個(gè)氨基酸,189個(gè)氨基酸的膜外功能區(qū),23個(gè)氨基酸的跨膜區(qū),36個(gè)氨基酸的胞漿功能區(qū)。大鼠SCF與小鼠和人的SCF同源性分別為94%和79%。SCF有2種存在形式:可溶性和膜結(jié)合型。重組SCF和天然SCF